钙蛋白酶在七氟醚诱导老龄大鼠认知功能障碍中的作用

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目的:术后认知功能障碍(POCD)是老年患者术后常见并发症。POCD是脑功能暂时性机能障碍,可导致患者死亡率增加、术后并发症增多,康复延迟、住院天数延长和医疗费用增加等。大脑海马神经元作为与学习记忆有关的神经元,其发生炎性反应、氧化应激反应和凋亡与POCD有密切联系。钙蛋白酶是钙离子依赖半胱氨酸蛋白酶家族中的成员之一,可调节细胞多项活动,也是凋亡途径中重要的因子,其活性升高可导致神经元凋亡。七氟醚作为一种新型卤代羟基醚类吸人式全麻药物可诱导老龄大鼠海马神经元凋亡,引起认知功能障碍。但其机制是否与钙蛋白酶有关尚未见报道。本研究拟评价钙蛋白酶在七氟醚麻醉诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法:1健康雌性SD大鼠90只,18月龄,体重450~550 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=30)。对照组(C组)、七氟醚组(Sev组)和钙蛋白酶抑制剂MDL28170组(M组)。C组吸入50%O2-50%N2混合气3 h;Sev组吸入3%七氟醚3 h;M组尾静脉注射MDL28170 10 mg/kg,30 min后吸入3%七氟醚3 h,同时尾静脉MDL28170输注2 mg·kg-1·h-1。取大鼠,分别于麻醉前和麻醉后1-4 d时采用Morris水迷宫实验评价认知功能,记录逃避潜伏期和穿越原平台次数;分别于麻醉前和麻醉后1、5d水迷宫测试结束后,处死大鼠,取海马组织,采用流式细胞术测定神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度。Western blot测钙蛋白酶活性。2计量资料以均数±标准差((?)±s)表示,重复测量设计的计量资料比较采用重复测量设计的方差分析,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1 Morris水迷宫结果:与C组比较,Sev组和M组麻醉后1d时逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少(P<0.05);与Sev组比较,M组麻醉后1 d时逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增多(P<0.05);2神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度结果:与C组比较,Sev组和M组麻醉后1 d时神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度升高(P<0.05);与Sev组比较,M组麻醉后1 d时神经元凋亡率降低(P<0.05),胞浆钙离子浓度差异无统计学意义(P>0.05);3钙蛋白酶活性结果:与C组麻醉后1 d比较,M组和Sev组海马组织钙蛋白酶76/80 k Da升高(P<0.05);与Sev组比较,M组麻醉后1 d时海马组织钙蛋白酶76/80 k Da降低(P<0.05)。结论:1七氟醚诱导老年大鼠认知功能障碍可能与其诱导海马神经元凋亡有关。2七氟醚诱导海马神经元凋亡可能与钙蛋白酶介导的凋亡有关。
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