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癌症严重威胁人类的生命。据世界卫生组织统计,全世界每年死于癌症的病人大约500多万,癌症治疗和预防的任务十分艰巨。药物治疗是癌症治疗的三大疗法之一。多年来人类一直在不断地进行抗肿瘤药物的研究,抗肿瘤药物的筛选是整个研究过程中很重要的一个环节,而进行药物的筛选首先离不开合理的筛选方法和系统。世界各国对抗肿瘤药物的筛选都非常重视,投入了大量的人力、物力和财力,每年都有大量的化合物待筛(合成物、天然产物和微生物发酵产物)。找到有效、安全、副作用小的抗肿瘤药物一直是肿瘤药物研究者的追求目标。近年来,随着生命科学技术的进步发展,新的抗肿瘤药物不断涌现,尤其是药用植物中的抗肿瘤成分研究得到高度重视。
三叶青是一种重要抗肿瘤药用植物,在我国已有多年的使用历史,药理实验表明三叶青提取物有抗病毒作用和消炎镇痛及保肝作用,在民间三叶青用于抗肿瘤的治疗具有明显效果。本研采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水四种物质萃取三叶青各个不同溶解极性成分,采用水层提取物为研究对象,旨对不同提取物对肿瘤的抗性作用进行深入的研究,其主要研究内容和取得的结果如下:
1、按S180移植瘤的方法,建立S180小鼠实体瘤模型,设置两个三叶青剂量组(每天灌胃给予相当生药量5g/kgB.W、15g/kgB.W,按人服药量的10、30倍计算)、肿瘤对照组(灌胃给予蒸馏水)、阳性对照组(腹腔注射环磷酰胺20mg/kgB.W,隔天注射)和正常对照组(灌胃给予蒸馏水)。
采用给药10天于次日处死小鼠并剥离完整肿瘤组织的方法计算抑瘤率,结果显示三叶青高剂量组、阳性对照组抑瘤率达到36.06%、77.37%,具有明显的抑瘤的作用,而三叶青低剂量组抑瘤率只有6.64%,抑瘤作用不明显。
采用给药10天后于次日内眦静脉采血方法测定血液中SOD活力、CAT及MDA含量。结果表明,三叶青水层提取物高剂量组能显著提高荷瘤小鼠溶血液中CAT的活性、降低MDA的含量,但对SOD活性无明显作用。
通过给药10天后于次日内眦静脉采血,用流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8的含量,肿瘤对照组与正常对照组相比,结果表明:CD3、CD8分别升高了59.4%、58.7%,CD4降低了27.9%,CD4/CD8比值降低了45.5%。经三叶青提取物干预后,低剂量组各指标均无显著性改善,但高剂量组中,CD3、CD8明显降低,CD4明显升高,CD4/CD8比值升高,其中CD3、CD4、CD8已经接近正常组值。环磷酰胺阳性对照组与肿瘤对照组相比,CD3含量并未降低反而升高了58.5%,CD4明显升高,CD8有所降低,CD4/CD8比值升高且接近正常组的值。
2、按S180腹水瘤的方法,建立S180小鼠腹水瘤模型,设置两个三叶青剂量组(每天腹腔注射相当生药量5g/kgB.W、15g/kgB.W,按人服药量的10、30倍计算)、肿瘤对照组(腹腔注射蒸馏水)、阳性对照组(腹腔注射环磷酰胺20mg/kgB.W,隔天注射)和正常对照组(腹腔注射蒸馏水)。
采用给药10天后于次日抽取腹水的方法,通过流式细胞仪检测腹水细胞的凋亡情况,结果显示:三叶青提取物高剂量的腹水瘤细胞凋亡率达39.69%,其作用远高于对照组0.86%的细胞凋亡率。
综上结果,表明中药三叶青水层提取物具有明显的抗肿瘤作用,其作用机理与调节体内抗氧化酶活性、通过改善机体的T淋巴细胞亚群的功能恢复机体免疫功能及诱导细胞凋亡有关,可进一步展开深入研究。