论文部分内容阅读
近年来,光散射的理论与技术得到了快速的发展,出现了许多重要的光散射技术,广泛应用于物理化学、高分子化学、胶体科学和生命科学的研究,并在研究生物分子性质及自聚集行为、表征聚合体微粒的形成与粒径分布、探究表面/界面结构等方面发挥了十分重要的作用。Pasternack等建立的共振光散射(Resonance light scattering,RLS)技术,因具有灵敏度高、操作简便、仪器简单等优点,目前已经作为一种新的光谱分析技术在蛋白质、核酸、药物、糖类、无机离子及纳米粒子的分析研究中得到了广泛应用。然而,光散射技术普遍存在选择性较差,抗干扰能力不足的缺陷,给光散射技术的实际应用带来了不小的困难。本研究以克服光散射技术选择性差的缺陷为出发点,以RLS理论和实验技术方法为指导,将RLS技术与高选择性的免疫反应相结合,建立了共振光散射免疫分析方法。在此基础上,进一步将免疫反应引入固相表面,开发出了基于表面增强光散射(Surface enhanced light scattering,SELS)免疫传感器。该传感器既充分利用了RLS技术的优点,又有效地克服了RLS技术的不足,既拓展了RLS技术的应用领域,又丰富了免疫分析方法和免疫传感器的类型。 本文的主要研究内容及结论如下: (1)共振光散射技术在免疫分析中的应用研究。实验研究表明,单纯的抗原和抗体,在低浓度时,其RLS信号都比较弱,而抗原抗体发生免疫沉淀反应后,生成的免疫复合物会使RLS信号显著增强。当抗体浓度一定时,发生免疫反应后RLS散射强度增加值与抗原浓度的对数符合高斯分布函数,且高斯分布曲线的半峰宽(ω0)是抗原抗体反应的特征常数,直接反映了抗原抗体免疫反应的类别。据此,建立了定量分析检测抗原的共振光散射免疫分析方法。该方法简单、灵敏、特异性强、不需特殊标记,而且克服了传统的光散射免疫分析必须要求抗原抗体之间的比例完全匹配,