【摘 要】
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目的:研究Cxcl6基因在大鼠睾丸组织中的转录与表达情况。 方法:(1)研究对象:Wistar雄性大鼠2、4、6、8、10、12、14、15、16、20、25、29、30、31、35、40、45、50、55、60、65
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目的:研究Cxcl6基因在大鼠睾丸组织中的转录与表达情况。 方法:(1)研究对象:Wistar雄性大鼠2、4、6、8、10、12、14、15、16、20、25、29、30、31、35、40、45、50、55、60、65日龄。(2)将Wistar雄鼠和雌鼠合笼(从内蒙古大学实验动物中心购买,清洁级,标准饲料,在内蒙古医科大学基础实验楼饲养,记录鼠出生的具体时间,出生当天计第一天)。(3)取2-65日龄Wistar雄性大鼠。脊椎脱臼法处死不同时间点的雄性大鼠,取睾丸组织。每个时间点3只不同窝别的大鼠。(4)睾丸组织提取总RNA及总蛋白,浓度测定及纯度检测。采用总RNA提取试剂盒及全蛋白提取试剂盒,紫外分光光度计测量RNA纯度及浓度。(5)RNA反转成cDNA。(6)采用链霉菌抗生物素-过氧化酶连接(SP)免疫组织化学方法检测GCP-2蛋白在大鼠睾丸组织中的表达情况。(7)采用Real-time PCR检测大鼠睾丸组织中Cxcl6mRNA的转录情况。 结果:提取2-65日龄的雄性Wistar大鼠总RNA及总蛋白。在mRNA水平,Cxcl6基因在大鼠出生后2-65天mRNA表达模式:出生后第2天开始缓慢下降,到第10天达到最低值,一直持续到第20天,从第20天开始迅速线性上升,29天达到最高值,然后开始下降,第35天下降到最低值后开始上升,上升到第45天又开始下降,第65天达到最低值。其中29日龄大鼠睾丸组织Cxcl6mRNA表达最高。在蛋白水平,免疫组化结果显示Cxcl6在大鼠早期发育睾丸组织中的精母细胞边缘和圆形精子近核及长形精子处表达。 结论:(1)Cxcl6基因表达与精子发生可能相关。(2)Cxcl6基因在大鼠早期发育睾丸组织表达,促进精原干细胞的增殖。(3)Cxcl6基因在减数分裂后期开始表达,参与圆形精子的形成及精子细胞变态转变为成熟精子的过程。
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