【摘 要】
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本研究主要采用基因克隆技术,以Real Time PCR为手段,对青海大通牦牛脑组织线粒体中的腺苷酸转运酶(ANT)基因CDS序列进行克隆测序,设定平原黄牛为对照组,对ANT1、ANT2基因采用SYBR
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本研究主要采用基因克隆技术,以Real Time PCR为手段,对青海大通牦牛脑组织线粒体中的腺苷酸转运酶(ANT)基因CDS序列进行克隆测序,设定平原黄牛为对照组,对ANT1、ANT2基因采用SYBR Green相对荧光定量方法进行mRNA相对表达量的测定。结果如下:1、通过对成年牦牛ANT1、ANT2基因CDS序列的测定,DNA-man分析比较后发现,牦牛ANT1、ANT2基因与黄牛ANT1、ANT2基因CDS序列基本一致,只有个别碱基不同。可见,ANT作为线粒体溶质载体家族的一员,其基因的保守性很强;2、通过对成年牦牛ANT1、ANT2基因在大脑不同区域的相对表达量的测定。分析其结果显示:①ANT1、ANT2基因在牦牛及黄牛大脑不同区域中均有不同程度的表达量,且存在差异(P<0.05);②在大脑的相同区域内,牦牛ANT1及ANT2基因的表达量均高于黄牛ANT1及ANT2在大脑中的表达量,亦存在差异性(P<0.05);③在大脑同一区域内,牦牛及黄牛ANT1基因表达量均高于ANT2基因的表达量,亦存在差异显著性(P<0.05)。结论:1、牦牛ANT基因CDS序列具有高度保守性,与黄牛具有高度的同源性。2、牦牛ANT1、ANT2基因表达量高于黄牛ANT1、ANT2基因表达量,提示:ANT在适应低氧环境上起着一定的作用。3、牦牛与黄牛在低氧条件下ANT1基因表达量明显高于ANT2基因。表明ANT1基因的表达可能更利于牦牛线粒体对低氧的适应。
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