目的：构建人pcDNA3.1(+)/RIZ1真核表达载体并转染人食管鳞状细胞癌TE-13细胞,观察RIZ1在TE-13稳定细胞株中的表达。方法：1.用RT-PCR方法从人食管癌组织中提取tRNA。2.将从食管癌组织中提取的tRNA逆转录为cDNA。3.根据NCBI公布的RIZ1序列设计五对引物。4.从食管癌组织的cDNA中对RIZ1各段进行PCR扩增。5.将扩增的PCR产物连入T载体,并测序。6.将测序正确的含PCR产物的质粒酶切后连入pcDNA3.1(+)真核表达载体。7.将连入pcDNA3.1(+)的RIZ1基因进行酶切鉴定并测序。8.复苏并培养人食管鳞状细胞癌TE-13细胞。9.提取pcDNA3.1(+)/RIZ1超纯质粒。10.将pcDNA3.1(+)/RIZ1超纯质粒转染入人食管鳞状细胞癌TE-13细胞。11.Western-blotting鉴定pcDNA3.1(+)/RIZ1在人食管鳞状细胞癌TE-13细胞中蛋白表达。结果：1.PCR扩增产物经12gL琼脂糖凝胶电泳鉴定目的基因条带大小约5157bp,与理论预期值一致。构建完成人重组RIZ1真核表达载体pcDNA3.1(+)/RIZ1,测序结果经BLAST比对,与NCBI公布的RIZ1序列完全一致。2.Western boltting检测显示,转染pcDNA3.1(+)RIZ1的人食管鳞状细胞癌TE-13细胞中RIZ1蛋白获得表达。结论：成功构建人重组RIZ1真核表达载体并转染人食管鳞状细胞癌TE-13细胞,转染细胞株中RIZ1蛋白呈显著表达。