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目的:通过动态观察益肾化瘀方对UUO模型大鼠24h尿蛋白定量、肾功能、肾组织形态学变化以及对肾组织中波形蛋白表达变化的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机理,为临床上应用益肾化瘀方治疗 CRF提供理论依据。
方法:将 150 只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、洛汀新组、益肾化瘀方高剂量组和益肾化瘀方低剂量组五组,每组分别为30只。除假手术组外,其余大鼠均采用单侧输尿管结扎的方法制备肾间质纤维化模型;各组大鼠分别于术后第3、7、14、21、28天,每组随机选6只大鼠,观察各组大鼠24h尿蛋白定量及肾功能的变化;光镜下观察大鼠肾组织形态结构变化;采用免疫组化法观察大鼠肾组织中波形蛋白的表达变化。
结果:
(1) HE 染色显示:假手术组大鼠肾组织在各实验时间点内无明显变化;模型组大鼠肾组织随着实验察天数的增加肾小管间质病变日趋严重,具体表现为肾间质内大量炎症细胞浸润、部分肾小管扩张或萎缩,并呈进行性发展形成纤维化病变。益肾化瘀方高、低剂量组及洛汀新组大鼠肾小管间质纤维化病变则相对较轻。
(2) 免疫组化半定量积分值显示:假手术组大鼠肾组织中波形蛋白微量表达,随时间延长无明显变化;模型组及各药物干预组大鼠肾组织中波形蛋白阳性染色主要在肾小管间质大量出现,并随时间延长而增多,均较同期假手术组有显著差异(P<0.05);洛汀新组和益肾化瘀方高剂量组肾小管间质中波形蛋白表达均低于模型组,二者无统计学差异(P>0.05)。
结论:益肾化瘀方可以降低 SCr、BUN,改善肾功能,从而延缓慢性肾衰的发展;益肾化瘀方可以减轻肾脏病理改变,降低肾组织中波形蛋白的表达,防治肾间质纤维化;其作用机制可能是通过抑制肾小管上皮细胞向间质细胞的表型转化,降低肌成纤维细胞的集聚,达到其防治肾间质纤维化作用。总之,益肾化瘀方可以用于防治肾间质纤维化,治疗慢性肾功能衰竭,但其作用机理还需进一步研究。