细胞色素P450是植物中家族成员最多的一类酶蛋白,在参与胁迫反应与植物的生物合成途径中发挥至关重要的作用。到目前为止,在水稻、拟南芥、烟草以及黑色三角叶杨等植物中有相关报道,目前关于苹果P450的功能报道很少,有许多的功能研究还不是很清楚。本研究从‘寒富’苹果中克隆出细胞色素P450 CYP716B1-like基因的全长,分别构建了其过表达载体与沉默载体,通过遗传转化得到了苹果转基因植株,并通过分析其转录组数据,获得许多差异表达的基因,为揭示苹果CYP716B1-like基因的功能奠定基础。主要结果如下:(1)利用RT-PCR技术从‘寒富’苹果中克隆出MdCYP716B1-like基因序列。亚细胞定位试验证明MdCYP716B1-like定位在叶绿体中。(2)利用qRT-PCR方法检测了‘寒富’二倍体苹果与其同源四倍体苹果不同组织器官中MdCYP716B1-like基因的相对表达量,在‘寒富’二倍体根中的表达量最高,茎、花、果相对次之,在叶中表达量最少;在其同源四倍体中,MdCYP716B1-like基因在果中的表达量最高,根与茎的表达量基本相同,在花与叶中表达量最低。(3)分析MdCYP716B1-like基因的启动子,发现含有响应激素的顺式作用元件,利用qRT-PCR方法检测到‘GL-3’中MdCYP716B1-like基因的表达水平受到ABA和MeJA不同程度的诱导。(4)分别构建了MdCYP716B1-like基因的过表达载体和沉默载体,并通过农杆菌介导的方法转化苹果‘GL-3’叶片,获得了4个过表达株系的转基因苹果与3个沉默株系的转基因苹果。(5)通过接种苹果炭疽菌,发现过表达MdCYP716B1-like基因的转基因苹果植株相较于野生型呈现更严重感病症状,沉默植株相较对野生型发病较轻,表明MdCYP716B1-like基因功能与植物-真菌互作有关。(6)对过表达MdCYP716B1-like的转基因植株与对照植株的转录组测序分析发现,大量差异表达基因集中在植物-病原互作途径、MAPK级联信号通路、植物激素转导途径和三萜类化合物合成途径,从中挑选JAR1、TIFY、PYL4、SAUR72、NPR1、TGA7、WRKY29、WRKY22、WRKY26、RPM1、PR1、SE3、SQS和OSC4等基因进行表达水平的qRT-PCR验证,其结果与转录组数据中表达量变化的趋势相同,进一步说明MdCYP716B1-like基因功能可能与植物免疫相关。