CD137L在非小细胞肺癌细胞株上的表达及功能的初步研究

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目的:检测人CD137配体(CD137L)在人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549、H460、A2、SK-MES-1、SPC-A1上的表达情况,初步研究其对NSCLC生物学行为的影响。方法:1、采用逆转录-聚合酶链(RT-PCR)、流式细胞术(FACS)的方法检测人CD137LmRNA及蛋白水平在NSCLC细胞株A549、H460、A2、SK-MES-1、SPC-A1上的表达情况;用蛋白免疫印迹实验(western blot)验证CD137L蛋白在A2细胞株上的表达。2、用CCK8的方法检测A2细胞在PBS、CD137-FC或IgG1-FC包被的培养板里培养24h、48h、72h时的增殖情况。3、用Alexa Fluor488Annexin V/PI双染的方法检测A2细胞在PBS、CD137-FC或IgG1-FC包被的培养板里培养24h的凋亡情况。4、用FACS的方法检测A2细胞在D137-FC、IgG1-FC包被的培养皿里培养48h后程序死亡因子配体(PD-L1)的表达情况。结果:1、CD137LmRNA及蛋白水平在NSCLC细胞株A549、H460、A2、SK-MES-1、SPC-A1上均有不同程度的表达。2、CD137-FC包被组A2细胞增殖与IgG1-FC及PBS包被组相比显著增强,差异有统计学意义(P<0.05);IgG1-FC包被组细胞增殖情况与PBS包被组相比差异无统计学意义(P>0.05)。3、PBS、CD137-FC或IgG1-FC各包被间A2细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。4、CD137-FC能上调A2细胞表面PD-L1的表达。结论:CD137L在多种非小细胞肺癌细胞株上均有不同程度的表达,CD137L介导的逆向信号能促进肺癌细胞的增殖,并能上调PD-L1的表达,但对凋亡却未见到明显影响,可能在非小细胞肺癌的发生、发展中发挥一定作用。
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