水体中大肠杆菌富集新方法的建立

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关注共享水的安全问题,是一个十分重要的社会问题。由于大肠杆菌感染剂量很低,并且是许多食源性和水源性胃肠炎的发病源头,因此对于大肠杆菌的检测十分重要。为了能够准确检测水中的大肠杆菌,人们一直致力于发展一些具有生物特异性的方法。而多种技术的开发,已被证明难以实现所有相关类型病毒的检测。同时少量采样和局部采样,对实际的生活和生产中的大量水样起不到有效的检测。因而大量地,快速地富集水样对于检测就成为一个关键性的手段。本文讨论了一些常用的富集手段,并且综合前人的经验和努力,致力于发展一种新的手段和方法来提高细菌的富集效率,缩短富集的时间,为传统的细菌培养技术和新型的生物分子监测技术提供支持,提高肠道病菌的检测效率和准确性。本论文当中采用两步富集方式对水体中的大肠杆菌0157:H7进行富集回收和检测。一步富集方式即超滤,使用聚丙烯膜对0157:H7进行富集回收,并且在超滤过程中采取反冲洗方式,提高了一步富集的回收效率,富集效率最高可达67.21%;二步富集方式中采用磁性包被粒子对0157:H7进行回收。包被物质均采用无毒,并且生物相容性好的一些物质,合成了氨基磁珠,羧基磁珠,和壳聚糖包被磁珠,对其磁性,XRD,红外等性质作了表征,并对其等电点进行了测定。比较了三种磁珠不同pH值,不同磁珠量,不同吸附时间下的吸附效果。发现氨基磁珠磁珠量在2.5ml时,对大肠杆菌的吸附能力可以达到百分之百,提高了对大肠杆菌的二步富集效率。通过两步富集手段,将水体的体积浓缩至可以测定的范围,浓缩倍数达到500倍。降低了由大体积水样的局部取样造成的测定结果不准确的概率,为细菌检测提供了保障。
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