多疣壁虎提取物抗肿瘤作用研究

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本文分离多疣壁虎提取物,分别探讨其体外对食道癌细胞株CaEs-17、肝癌细胞株QGY-7701的增殖抑制作用及机理;体内对H22、ECA腹水瘤小鼠生命延长率,以及对S180、H22实体瘤小鼠瘤重的影响。首先,提取多疣壁虎60%醇提物Ⅰ、生物碱样物质Ⅱ,显色反应证实提取物Ⅱ含有生物碱成分。由生物碱样物质Ⅱ分离提取物A、B,显色反应证实其均含有生物碱成分,并用HPLC分析其分离效果。其次,体外细胞实验中,通过MTT法检测分离得到的2种提取物对癌细胞的增殖抑制作用,结果表明多疣壁虎60%醇提物Ⅰ、生物碱样物质Ⅱ能显著抑制肝癌细胞株QGY-7701、食道癌细胞株CaEs-17生长,且都具有时间、剂量依赖性。药物处理72h后,流式细胞仪检测提取物对癌细胞的促凋亡作用,证实提取物Ⅰ、Ⅱ (800μg/mL、100μg/mL、12.5μg/mL)具有诱导癌细胞凋亡的作用,提取物Ⅰ对CaEs-17、QGY-7701细胞的凋亡率分别为72.24%、53.61%、45.69%和67.75%、22.19%、18.41%,提取物Ⅱ的凋亡率分别为60.59%、48.27%、34.67%和43.54%、20.99%、14.68%。显微镜下观察药物处理后癌细胞形态变化,结果表明QGY-7701细胞贴壁能力降低、碎片增加、状态明显变差。Western Blot分析提取物Ⅰ、Ⅱ对QGY-7701细胞Bax、Bcl-2基因表达情况的影响,结果表明药物处理48h后, Bcl-2基因的表达随着药物浓度的增加而明显降低,但对Bax基因的表达没有显著影响,这可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的作用机理。最后,体内建立腹水型、实体瘤小鼠模型,检测提取物Ⅰ对H22、ECA腹水瘤小鼠生存时间的影响,以及对S180、H22实体瘤小鼠瘤重的影响。实验表明提取物Ⅰ可以延长H22、ECA腹水瘤小鼠的生存时间,降低S180、H22实体瘤小鼠瘤重。
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