人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus,HPV）是一种嗜上皮性病毒,主要引起尖锐湿疣和宫颈癌。其中HPV52是引起尖锐湿疣的主要型别,HPV52预防性疫苗的研制具有广阔的前景、一定的社会和经济效益。研究表明,HPV类病毒样颗粒（Virus-like particles,VLPs）可以通过HPV L1蛋白在体外自组装形成,保留了天然构象,且具有免疫原性,是理想的HPV预防性疫苗形式,目前所上市的HPV预防性疫苗均为这种形式。本研究利用大肠杆菌可溶性表达HPV52 L1蛋白,体外解组装,重组装成VLPs,具有良好免疫原性。首先从GenBank中获得HPV52 L1全基因序列,根据大肠杆菌偏好性进行密码子优化,合成全基因序列,构建表达载体pET-30a-HPV52 L1和pCold-HPV52 L1,双酶切鉴定成功后转入四种感受态细胞ER2566、Tuner、BL21（DE3）、BL21 Star^TM（DE3）,经SDS-PAGE鉴定筛选最佳表达菌株为BL21 Star^TM（DE3）,最佳表达条件,温度为16℃,20℃,25℃,IPTG浓度为0.025 mmol/L,0.05 mmol/L,0.1 mmol/L,表达时间为16 h,经SDS-PAGE鉴定结果最终确定表达条件为25℃,IPTG浓度为0.1 mmol/L,诱导时间为16 h。通过POROS 50HS阳离子交换层析柱纯化HPV52 L1重组蛋白,以含1.25 mol/L NaCl洗脱缓冲液将目的蛋白洗脱下来,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定,获得了高纯度的L1重组蛋白。通过用odyssey近红外激光成像系统扫描并测得,洗脱液中获得的重组蛋白纯度高达90%以上。通过体外解组装,重组装获得均一、稳定VLPs。VLPs免疫6⁸周龄雌性BALB/c小鼠,通过动物实验表明,该VLPs疫苗具有良好免疫原性,能诱导产生高滴度的HPV52中和抗体。本研究利用大肠杆菌可溶性表达了高纯度HPV52 L1蛋白,获得了廉价、有效的HPV52 L1 VLPs,本研究建立了实验室水平的VLPs制备,为HPV52预防性疫苗研究奠定了基础。