不同菌种所致脓毒症心肌损伤表型特征的实验研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szxszxszy
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目的初步探究大鼠在体实验中,革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌所致脓毒症诱导的心肌损伤相关指标的变化及其区别,为早期鉴别脓毒症病原体提供一定的实验基础。方法(1)雄性SD大鼠105只,随机分为生理盐水(NC)组革兰氏阳性细菌脓毒症(SA)组、革兰氏阴性细菌脓毒症(EC)组,SA组:腹腔注射3ml热灭活金黄色葡萄球菌;EC组:腹腔注射3ml热灭活大肠埃希菌,NC组腹腔注射等量生理盐水。根据菌种浓度将SA及EC组分为低剂量、中剂量、高剂量组,其注射浓度分别为:SA低剂量组(SAL):5.2x1012CFU/kg、中剂量组(SAM):7.35x1012CFU/kg、高剂量组(SAH):9.45×1012CFU/kg;EC低剂量组(ECL):1.05x1012CFU/kg、中剂量组(ECM):1.26x1012CFU/kg、高剂量组(ECH):1.47×1012CFU/kg。(2)建模成功后分别于6 h、12 h、24 h、48 h、72 h采集各组大鼠心肌血液,采用Elisa试剂盒检测c Tn I、TNF-α、IL-1β的含量,并于相应时间点行心肌组织HE染色。(3)于24 h、48 h、72 h检测中剂量组线粒体自噬蛋白PINK1及Parkin蛋白的表达水平。结果(1)与生理盐水组相比,SA组及EC组大鼠感染后均出现死亡,死亡率呈浓度依赖性增高。(2)与生理盐水组相比,SA组及EC组感染后各组大鼠脓毒症评分从6 h开始出现明显上升(P<0.05),且SA组较EC组各时间点脓毒症评分上升(P<0.05)。(2)SA组及EC组各组血清c Tn I含量6 h开始升高,至24 h达到峰值,48 h开始出现下降(P<0.05)。(3)SA组及EC组各组血清中测得TNF-α及IL-1β的含量于6 h达到峰值,于12 h开始出现下降,且48 h、72 h较12 h明显下降(P<0.05)。(4)HE染色后,SA组及EC组各剂量组心肌组织中均出现病理学差异,且SA组在24 h前炎性浸润较EC组增强,较NC组,ECL、ECM组病理学评分24 h开始明显升高(P<0.05),ECH、SAL、SAM、SAH组12 h开始明显升高(P<0.05);与ECL组相比,ECM组病理学评分24 h开始明显升高(P<0.05);与ECM组相比,ECH组病理学评分12 h开始明显升高(P<0.05);与SAL组相比,SAM组病理学评分24 h开始明显升高(P<0.05);与SAM组相比,SAH组病理学评分12 h开始明显升高(P<0.05)。(5)PINK1、Parkin蛋白表达在线粒体中,所测SA组及EC组中剂量组PINK1、Parkin蛋白从24 h开始表达水平出现上升,且较NC组蛋白表达水平升高(P<0.05),于48 h达到峰值(P<0.05);72 h测得PINK1及Parkin蛋白表达水平出现降低,但仍高于24 h(P<0.05)。结论在腹腔注射热灭活革兰氏阳性细菌及革兰氏阴性细菌构建的脓毒症模型中,革兰氏阳性细菌所致脓毒症心肌损伤程度较革兰氏阴性细菌所致脓毒症严重,相关表型特征炎症因子TNF-α和IL-1β早期明显升高,后出现时间依赖性下降,心肌肌钙蛋白I、线粒体自噬活性出现先升后降的变化。
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