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【目的】研究有机修饰的硅纳米粒子介导生存素基因修饰嗅鞘细胞。
【方法】准备纳米粒子ORMA40,透射电镜检测纳米粒子ORMA40的形态。检测Survivin质粒及纳米粒子ORMA40与Survivin质粒的复合物。培养和纯化嗅鞘细胞,用兔抗p75抗体免疫细胞化学染色鉴定嗅鞘细胞。将纳米粒子ORMA40与Survivin质粒结合成复合物后,转染嗅鞘细胞。荧光显微镜观察增强绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。转染3天后行Survivin免疫细胞化学染色,检测生存素(Survivin)的表达。
【结果】透射电镜检查证实该纳米粒子在水溶液中分散良好。经DNA酶1作用后,生存素质粒被完全降解,而生存素质粒与纳米粒子ORMA40结合者却完全得到保护。经兔抗p75抗体免疫细胞染色证实,嗅鞘细胞可以得到纯化。转染ORMA40-mSur复合物的嗅鞘细胞能表达生存素(Survivin)和增强绿色荧光蛋白(EGFP)。转染ORMA40-pSur复合物的嗅鞘细胞能表达生存素(Survivin)。
【结论】纳米粒子ORMA40介导Survivin质粒转染嗅鞘细胞的方法简单有效是一种较为理想的基因转染方法。