论文部分内容阅读
日本乙型脑炎(Japanese encephalitis,JE)简称乙脑,是由日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)引起的一种中枢神经系统感染的人兽共患病。乙型脑炎病毒是黄病毒科黄病毒属成员之一,主要经蚊虫传播。JEV广泛流行于亚洲和西太平洋地区,由于目前缺乏有效的抗病毒治疗方法,疫苗接种是唯一可以长期避免JEV感染的有效途径。免疫记忆的形成是多种疫苗发挥保护功能的基础,为了开发更有效的乙脑疫苗,寻找JEV刺激机体产生免疫记忆的规律,探究影响JEV免疫记忆形成的因素十分必要。本研究以6~8周龄雌性C57BL/6小鼠尾静脉注射103 PFU病毒作为感染模型。于感染后第10天和第45天分别分离小鼠的脾脏、淋巴结及骨髓细胞等,流式细胞术检测分析与免疫记忆形成相关的分子和细胞;建立体内剔除髓系来源的抑制性细胞(MDSCs)的模型和体内回输MDSCs的模型,验证MDSCs对免疫记忆的影响;二次感染进一步验证MDSCs对T、B细胞免疫记忆的作用。结果显示:疫苗株SA14-14-2感染组小鼠体内CD8+MPECs、CD127、CD4 TCM/TEM、CD8 TCM/TEM细胞的比例显著高于野毒株P3感染组;P3感染组小鼠体内的GC B、Tfh、LL-PCs、CD8+SLECs细胞的比例显著高于SA14-14-2感染组;体内剔除和回输MDSCs后首次感染实验证实P3早期诱导产生的MDSCs抑制了CD8+MPECs、CCR7、CD4 TCM/TEM、CD8 TCM/TEM、GC B、Tfh、Bmem、LL-PCs细胞的产生;二次感染MDSCs剔除组的T细胞的活化以及生发中心反应显著低于对照组。综上所述,本研究得出以下结论:SA14-14-2能刺激机体产生较好的T细胞免疫记忆;而P3则倾向于刺激机体产生B细胞免疫记忆;P3感染早期诱导产生的MDSCs抑制了T、B淋巴细胞免疫记忆的产生进而影响了JEV二次免疫应答。本研究阐明了疫苗株SA-14-14-2与强毒株P3感染机体后免疫记忆形成的差异,首次提出了MDSCs是调控抗病毒免疫记忆形成的关键因素,为乙脑疫苗的研究及新型疫苗佐剂的研发提供了新思路及理论依据。