目的：建立裸鼠脉络膜黑色素瘤移植肿瘤模型，通过检测空白对照组、阴性对照组、注药组各组肿瘤组织中的血管内皮生长因子拮抗剂(vascularendothelialgrowthfactorantagonist，VEGF)、凋亡抑制因子(Survivin)、增殖细胞相关核抗原(Ki67)的蛋白水平表达以及mRNA表达水平，探讨血管内皮生长因子拮抗剂贝伐(Bevacizumab)对人眼脉络膜黑色素瘤(choroidalmelanoma，CM)细胞系OCM-1细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其可能的机制。　　 方法：　　 1．OCM-1细胞体外培养：OCM-1细胞复苏后在RPMI-1640完全培养基中培养，置于37℃、5％C02恒温恒湿培养箱内孵育。取对数生长期细胞进行实验，调整细胞密度为7＋l06/ml以备使用。　　 2．建立裸鼠脉络膜黑色素瘤移植肿瘤模型：OCM-1细胞植入18只雌性裸鼠腋周皮下，建立移植肿瘤模型后随机分成空白对照组（A组）、阴性对照组(B组)、注药组（C组）。A组未作处理；B组腹腔注射生理盐水0.2ml;C组以5mg/kg剂量腹腔注射生理盐水稀释的贝伐溶液0.2ml。连续用药14d，期间观察裸鼠健康状况，称量裸鼠重量，并测量肿瘤体积。14d后以脱颈椎法处死裸鼠，称量肿瘤重量并计算抑瘤率。　　 3．HE染色观察CM大体组织学形态：将提取的肿瘤组织置于4℃多聚甲醛中固定过夜以后，梯度酒精脱水，石蜡包埋，切成4～5μm厚的组织片行常规HE染色，光镜下观察肿瘤组织病理学变化。　　 4．用免疫组织化学染色法检测各组肿瘤组织Survivin、Ki67表达情况；取各组部分移植瘤组织，常规4％多聚甲醛溶液固定过夜，梯度乙醇脱水，石蜡包埋，连续切片(4μm)，具体步骤按PV-9001的说明书进行操作，并用二氨基联苯胺(DAB)显色。其中，Survivin、Ki67各一抗的稀释浓度分别为1：100和1：200，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。结果判断：(1)Survivin染色的判断标准：以细胞浆染为淡黄至棕黄色定义为阳性细胞；(2)Ki67增殖指数：以胞核染为淡黄至棕黄色定义为阳性细胞；以此观察各组肿瘤组织Survivin、Ki67的蛋白表达水平。　　 5．逆转录聚合酶链反应(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction，RT-PCR)分析各组VEGF和SurvivinmRNA水平的表达。取新鲜的各组移植瘤组织约100mg，按说明书用Trizol抽提RNA，以mRNA为模板，逆转录合成cDNA，然后以合成的cDNA为模板，在TaqDNA聚合酶作用下扩增Survivin，VEGF及其特定片段。PCR反应结束后，取5μl扩增产物在1.5％的琼脂糖凝胶上电泳。凝胶用日本Bio-Rad成像分析系统观察拍照，将Survivin和VEGF分别与β-actin的灰度值之比作为其mRNA产物的相对表达量，进行半定量分析。　　 6．统计学处理：采用SPSS13.0统计学软件进行统计学处理。所有实验数据均以x±s表示，不同组裸鼠重量，肿瘤重量，肿瘤体积的比较采用单因素方差分析，组间的两两比较采用LSD-t检验。不同组免疫组织化学和RT-PCR结果的比较采用非参数Kruskal-WallisH检验，各组间的两两比较采用Nemenyi检验。统计学检验采用双侧检验，P＜0.05为差异有统计学意义。　　 结果：　　 1．经过治疗后，C组肿瘤体积、重量分别为(598.86±321.81)mm3、（0.66±0.15）g，A、B组肿瘤体积、重量分别为（1715.15±278.16）mm3、(1.54±0.39）g、（1750.23±206.36）mm3、（1.54±0.31）g，C组与A、B组肿瘤体积、重量比较，差异均有统计学意义(F=34.53，P＜0.05)(F=8.69，P＜0.05);C组抑瘤率为57.14％。　　 2．HE染色结果：A组和B组中可见肿瘤组织血管丰富，局部可见大片无清晰结构的坏死区，肿瘤细胞间排列紧密而紊乱、大小不均，肿瘤细胞具有明显的异型性，病理性核分裂像常见，两组之间无明显差别。C组肿瘤组织中血管较A组及B组减少，坏死区面积减少，细胞排列较规律，肿瘤细胞异型性没有其它两组显著，病理性核丝分裂像也较其它两组少见。　　 3．CM肿瘤组织中VEGF，Survivin，Ki67蛋白水平或mRNA水平检测结果：A、B、C组Ki67增生指数分别为（51.85±1.32）％、（46.30±1.39）％、(27.90±0.90)％，C组与A、B组比较，Ki67增生指数差异有统计学意义(H=15.17，P＜0.05)。C组SurvivinmRNA表达为（0.49±0.02），A、B组SurvivinmRNA表达分别为（0.82±0.05）、（0.61±0.05），与A、B组比较，C组SurvivinmRNA表达差异有统计学意义(F=15.17，P＜0.05)。C组VEGFmRNA表达为（0.32±0.08），A、B组VEGFmRNA表达分别为（0.73±0.07）、（0.80±0.04），与A、B组比较，C组VEGFmRNA表达差异有统计学意义(F=12.05，P＜0.05)。　　 结论：血管内皮生长因子拮抗剂贝伐能够抑制OCM-1裸鼠移植瘤的生长，其机制可能与抑制VEGF活性，下调Survivin表达，抑制细胞增生有关。