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研究背景:系统性红斑狼疮（Systemic lupus erythematosus,SLE）是一种具有多种临床表现的人类自身免疫性疾病。在大多数情况下,涉及的重要器官包括脑,心脏,关节,皮肤和肾脏。SLE的发病机制复杂,现有研究表明免疫功能紊乱是其发病的主要原因之一。人参是一味传统中药,具有补气固脱,健脾益肺,宁心益智,养血生津的作用,人参皂甙（Ginsenoside,GS）作为人参根中提取的主要活性成分,现代药理已证实GS具有增强免疫的作用,故GS对自身免疫已经过度活跃者是否会加重病情,GS能否用于自身免疫性疾病的治疗,一直是医学界争论的焦点。在我单位的前期研究中,采用随机对照双盲的前瞻性临床试验证实:GS可以增强强的松治疗SLE的总有效率,更迅速地缓解SLE的病情活动、降低系统性红斑狼疮病情活动度（SLEDAI）评分,有利于激素的顺利撤减。为了进一步研究人参皂甙对SLE患者的免疫系统作用,我们设计了本实验。在本研究中,选择前期研究较充分、中药人参中含量较高的四种人参皂苷单体:人参皂苷Rb1（Ginsenoside Rb1）,人参皂苷Rh1（Ginsenoside Rh1）,人参皂苷Rg1（Ginsenoside Rg1）和人参皂苷Rg3（Ginsenoside Rg3）,探讨其对SLE的体液免疫调节的影响和作用机制。研究目的:通过体外实验研究GS单体对SLE体液免疫调节的影响,探讨GS对B细胞增殖、凋亡及其对B细胞分泌的IgG和IgM的调控作用,以及对B细胞相关因子及其亚群分布的影响。研究方法:1.人外周血单核细胞悬液制备:取健康成人外周血全血细胞,经离心分层,用移液器取淋巴细胞层,再用PBS清洗三次,加入1mL的RMPI-1640培养基重悬细胞,以获得单核细胞悬液（PBMC）。2.CD19+B细胞分选:利用CD19磁珠抗体标记PBMC,将标记后的PBMC置于分选柱（LS柱）中,再将LS柱置于分选器的磁场中,将细胞悬液过柱并收集被标记细胞。3.细胞培养:筛选出的CD19+B细胞加入采用含10%的胎牛血清,1%双抗液（青链霉素混合液）的RPMI-1640培养液,置于37℃,5%CO2的培养箱中进行培养。4.BrdU法检测不同浓度（0.1、1、10 mg/L）Rb1,Rh1,Rg1,Rg3+1μg/ml LPS干预对B细胞增殖的影响,并同LPS刺激培养下的B细胞进行比较。5.ELISA法检测不同浓度（0.1、1、10 mg/L）Rb1,Rh1,Rg1,Rg3+1μg/ml LPS干预对B细胞分泌IgG和IgM的影响,并同在LPS刺激培养下的B细胞的IgG与IgM分泌量进行比较。6.Western-Blot法检测在10 mg/L的Rb1,Rh1,Rg1,Rg3+1μg/ml LPS干预对B细胞凋亡相关因子Fas/FasL和caspase-3的表达,并同LPS刺激培养下的B细胞进行比较。7.RT-PCR法检测在10 mg/L的Rb1,Rh1,Rg1,Rg3+1μg/ml LPS干预下B细胞相关因子的基因BAFF及BLyS及其受体及β2M的表达。8.流式细胞术检测在10 mg/L的Rb1,Rh1,Rg1,Rg3+1μg/ml LPS干预下B细胞亚群CD19+CD27+CD32+的比例。研究结果:1.经过磁性分离分选后的CD19+B细胞纯度与分选前（17.3%）相比较大提升,为98.4%（P<0.05）。2.BrdU法结果显示,与空白组相比,LPS组B细胞增殖率升高（P<0.05）;与LPS组相比,四种人参皂苷单体均具有抑制B细胞增殖的作用（P<0.05）,并且抑制作用呈剂量依赖性。3.ELISA法结果显示,与空白组相比,B细胞分泌IgG和IgM增加（P<0.05）;与LPS组相比,四种人参皂苷单体均具有抑制B细胞分泌IgG和IgM的作用（P<0.05）,并且抑制作用呈剂量依赖性。4.Western-Blot法结果显示,与空白组相比,LPS组的B细胞相关凋亡蛋白Fas/FasL和凋亡激活蛋白caspase-3的表达降低;与LPS组相比,四种人参皂苷单体均能够增加Fas/Fas L和caspase-3的表达。5.RT-PCR法结果显示,与空白组相比,LPS组的B淋巴细胞刺激因子（BLyS）及其受体BCMA,TACI和B细胞激活因子（BAFF）及其受体BAFF-R和β2-微球蛋白（β2M）的mRNA表达水平均上调（P<0.05）;与LPS组相比,四种人参皂苷单体均能够下调BLyS及BAFF及其受体及β2M的mRNA表达水平（P<0.05）。6.流式细胞术结果显示,LPS组CD27+B细胞的比例增加（P<0.05）,CD19+B细胞的比例减少（P<0.05）,FcγRIIB（CD32）的表达水平降低（P<0.05）;与LPS组相比,Rb1,Rh1和Rg3均能够增加CD19+B细胞的比例（P<0.05）,降低CD27+B细胞的比例（P<0.05）,并且能增加FcγRIIB的表达水平（P<0.05）。结论:四种人参皂苷单体可以通过抑制B细胞增殖,减少B细胞分泌物IgG和IgM的分泌,提升B细胞凋亡相关蛋白和抑制B细胞相关因子的表达,以及调控B细胞亚群分布来下调LPS诱导下的系统性红斑狼疮模型的体液免疫,其中Rh1抑制体液免疫的效果最为明显。