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髓样细胞表达的触发受体-2(triggering receptor expressed on myeloid cells-2, TREM-2)是2000年发现的髓样细胞表达触发受体家族成员,主要表达于巨噬细胞和成纤维细胞等细胞。TREM-2通过激活细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)和酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinases, TPK),可活化部分T细胞;同时ERK信号通路参与抑制脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激后树突状细胞的凋亡。血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptides, VIP)是肺内重要的神经调节肽。VIP是否可通过影响TREM-2的表达,影响细胞的凋亡和增殖尚未见报道。目的：观察TREM-2与小鼠成纤维细胞凋亡和增殖的关系,初步探讨VIP对LPS应激的小鼠成纤维细胞TREM-2表达的影响及其机制。方法：1. TREM-2对小鼠成纤维细胞增殖与凋亡的影响构建TREM-2过表达质粒,按以下分组瞬时转染至小鼠成纤维细胞：①对照组、空质粒组和TREM-2过表达质粒组。采用荧光显微镜观察12h和24h小鼠成纤维细胞的转染效率；采用RT-PCR检测小鼠成纤维细胞中TREM-2mRNA的表达；采用流式细胞术检测小鼠成纤维细胞的细胞周期；②LPS组、LPS+转染试剂组、LPS+空质粒组和LPS+TREM-2过表达质粒组。采用PI染色细胞检测小鼠成纤维细胞的凋亡。2.VIP对LPS应激的小鼠成纤维细胞TREM-2表达的影响及其机制采用RT-PCR和流式细胞术分别从mRNA和蛋白水平检测VIP对LPS应激的小鼠成纤维细胞TREM-2表达的影响；并观察PKC信号通路阻断剂(H-7)、PKA信号通路阻断剂(H-89)、MAPK信号通路阻断剂(PD98059)和CaM信号通路阻断剂(W-7)对上述作用的影响。结果：1. TREM-2对小鼠成纤维细胞增殖和凋亡的影响(1)荧光显微镜检测结果显示：转染12h后,在小鼠成纤维细胞中观察到绿色荧光；24h时发绿色荧光的小鼠成纤维细胞比例约30%。(2) RT-PCR检测结果显示：与对照组(0.22±0.03)和空质粒组(0.25±0.03)相比,TREM-2过表达质粒组小鼠成纤维细胞中TREM-2mRNA的表达(1.02±0.14)明显升高(p<0.01)。(3)流式细胞术检测显示：与空质粒组(16.11±1.52)%相比,TREM-2过表达质粒组小鼠成纤维细胞处于G2/M期的比率(21.98±2.23)%明显增加(p<0.05)。(4)PI染色细胞检测凋亡结果显示：与对照组相比,加入LPS应激后,成纤维细胞中凋亡细胞明显增多；与LPS组相比,LPS+空质粒组凋亡细胞比例无明显变化,而LPS+TREM-2过表达质粒组的凋亡细胞明显减少。2.VIP对LPS应激的小鼠成纤维细胞TREM-2表达的影响及其机制(1) RT-PCR检测结果显示：LPS降低小鼠成纤维细胞TREM-2mRNA的表达(p<0.05),VIP可呈时间依赖性(0h、3h、6h、12h、24h)上调TREM-2mRNA的表达,且在6h达到峰值(p<0.01)；并呈剂量相关性(10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L)上调TREM-2mRNA的表达,以10-8mol/L作用最明显(p<0.01)。VIP(10-8mol/L)对LPS应激6h增加小鼠成纤维细胞TREM-2mRNA表达的效应可被H-7、H-89、PD98059和W-7所阻断(p<0.05)。(2)流式细胞术结果显示：LPS降低小鼠成纤维细胞TREM-2蛋白的表达(6848±1723.15；p<0.05),VIP可上调TREM-2蛋白的表达(23618±2888.44;p<0.01)。VIP(10-8mol/L)对LPS应激6h增加小鼠成纤维细胞TREM-2蛋白表达的效应可被H-7、H-89、PD98059和W-7所阻断(p<0.05)。结论：1. TREM-2促进小鼠成纤维细胞的增殖。2. TREM-2抑制小鼠成纤维细胞的凋亡。3.LPS降低小鼠成纤维细胞TREM-2的表达。4.VIP增加LPS应激的小鼠成纤维细胞TREM-2的表达,其胞内信号转导途径与PKC、PKA、MAPK及CaM有关。