【摘 要】
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林麝是国家一级濒危野生动物,其成熟雄性个体麝香腺中分泌的麝香,是传统中医行业中一种重要的中成药原料,也是广泛应用的中国本土的香料原料。麝香具有较高的医药用价值,因此在很多产业中具有举足轻重的地位。近年来中国林麝养殖逐渐成为一个较大的产业,但是林麝的相关研究,尤其是林麝泌香机制相关的研究滞后。有研究表明林麝的麝香腺中含有皮脂腺,其分泌的皮脂是麝香的重要组成成分,另有研究表明SOX9,Cav1和AR均
【基金项目】
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陕西省林业科学院科技创新专项计划(SXLK2021-0219);
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林麝是国家一级濒危野生动物,其成熟雄性个体麝香腺中分泌的麝香,是传统中医行业中一种重要的中成药原料,也是广泛应用的中国本土的香料原料。麝香具有较高的医药用价值,因此在很多产业中具有举足轻重的地位。近年来中国林麝养殖逐渐成为一个较大的产业,但是林麝的相关研究,尤其是林麝泌香机制相关的研究滞后。有研究表明林麝的麝香腺中含有皮脂腺,其分泌的皮脂是麝香的重要组成成分,另有研究表明SOX9,Cav1和AR均可参与皮肤皮脂腺中皮脂的分泌调控。因此本研究首要目的是探究皮脂腺分泌调节因子SOX9,Cav1和AR能否在林麝麝香腺中有所表达与定位,探究它们是否在麝香的分泌过程中发挥作用,从而为进一步提升麝香产量和质量提供理论支撑。为了探究麝香腺中是否存在皮脂腺分泌调节因子,本研究将林麝皮肤和麝香腺组织进行了转录组测序,利用生物信息学分析方法预测了林麝SOX9,Cav1和AR的基因信息,通过RT-qPCR,IHC和Western blotting等分子生物学实验探究了基因的表达水平及蛋白的组织定位情况,获得了以下主要结果:(1)林麝的皮肤和麝香腺组织的转录组测序分析显示,麝香腺中存在与调控皮脂腺功能有关的基因;(2)通过生物信息学方法分析了SOX9,Cav1和AR的同源性和蛋白质理化性质、功能结构、修饰位点、亚细胞定位以及二级和三级结构;(3)RT-qPCR,IHC和Western blotting等分子生物学实验表明SOX9,Cav1和AR在背部和腹部皮肤及麝香腺组织具有表达和定位。RT-qPCR结果与转录组的结果的高度一致,证明了转录组结果的可靠性。IHC和Western blotting结果显示SOX9,Cav1和AR在麝香腺和皮肤中有表达,并且SOX9和AR是定位于细胞核,Cav1是定位于细胞膜;(4)RT-qPCR结果表明腹部皮肤中SOX9,Cav1和AR的基因表达量显著高于背部皮肤和麝香腺,SOX9,Cav1和AR基因在背部皮肤和麝香腺中表达量差异不显著;IHC和Western blotting结果表明SOX9,Cav1和AR蛋白在背部皮肤和腹部皮肤中表达量相近,均低于麝香腺中的表达量;(5)HE染色结果首次展示了林麝皮肤中毛囊和皮脂腺以及麝香腺中香腺部的显微结构;综上,本研究通过生物信息学分析与分子实验发现林麝麝香腺与皮肤一样具有皮脂腺调节因子的表达定位,说明SOX9,Cav1和AR具有调控麝香腺分泌活动的潜力。本研究获得的转录组信息为进一步研究林麝泌香机制提供了科学资料,并为林麝养殖中提升麝香产量和质量提供了研究思路。
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