犬新孢子虫(Neospora Caninum),是一种细胞内寄生虫,它能够感染多种动物。对畜牧业来讲,犬新孢子虫最大的危害是可以导致怀孕母牛流产。犬新孢子虫病对整个牛群或某一地区牛群的繁衍有严重的威胁。目前还无有效的药物治疗犬新孢子虫病,虽然现已商品化的有灭活苗,但保护效果均不理想。因此,本研究试图在犬新孢子虫可溶性抗原中找出能够激活TH-1型免疫应答的抗原成分,为研究犬新孢子虫疫苗或疫苗佐剂奠定基础。首先,通过用不同处理的犬新孢子虫(热灭活、冷致死和活虫)及犬新孢子虫抗原(可溶性、非可溶性及全虫超声抗原)体外刺激免疫细胞,测定细胞因子分泌结果。实验结果显示,冷致死的犬新孢子虫能够诱导强烈的干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α和白介素-12的分泌,促使免疫应答向TH-1型发展,而热灭活的犬新孢子虫无此效应；犬新孢子虫抗原对免疫细胞的刺激具有浓度依赖性。其次,在犬的可溶性新孢子虫抗原中成功分离到了能有诱导免疫细胞产生TH-1型细胞因子的大分子复合物,并且分析证明该大分子复合物由核酸和蛋白类物质共同组成；免疫刺激活性随核酸的减少而降低,证明了该大分子复合物中犬新孢子虫的DNA和其他蛋白类物质一同参与了刺激免疫细胞的过程；最后通过293-TLR9细胞转导实验证明了TLR9参与了犬新孢子虫DNA诱导的免疫应答。