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本试验以葵花脱脂粕为原料,采用酶解与超声波辅助相结合的方法,提取葵花脱脂粕中的绿原酸,为拓宽葵花综合利用途径,实现绿原酸工厂化生产奠定基础。本论文主要完成以下研究,结果如下:
1.用乙醇提取葵花脱脂粕中的绿原酸。研究乙醇浓度、浸提时间、物料比以及pH对绿原酸提取率的影响,得到最适的工艺参数为:乙醇浓度75%,提取时间1小时,物料比1:14,pH为2的时候效果最好,绿原酸提取率可达到1.32%。
2.根据葵花脱脂粕的组成及各成分的性质,选择纤维素酶、蛋白酶、植物精提复合酶SPE-005及纤维素酶和蛋白酶复合,进行绿原酸的酶解提取工艺研究,结果表明纤维素酶和蛋白酶联合作用能显著提高绿原酸的提取率,最适的工艺参数为:酶解温度45℃,酶解时间1h,纤维素酶用量4mL,蛋白酶用量2mL,绿原酸提取率达到1.90%。
3.利用超声波辅助酶法作用于葵花脱脂粕,研究超声时间、超声强度、纤维素酶用量和蛋白酶用量对绿原酸提取率的影响,得到绿原酸提取的最佳工艺参数为:超声功率240W/m2、超声时间10min、纤维素酶用量6mL、蛋白酶2.5mL。绿原酸的提取率可以达到2.16%,可以较完全的提取葵花脱脂粕中的绿原酸。
4.以绿原酸粗提品为原料,进行绿原酸的纯化试验,研究结果表明,醋酸乙酯是萃取绿原酸的最适溶剂;pH为2.0的酸性条件下萃取4次,每次萃取5分钟,可以将溶液中的大部分绿原酸萃取出来,萃取率达到75.4%。利用高效液相色谱仪对萃取的绿原酸样品进行检测,结果表明纯度可以达到72.1%。
5.初步研究了纤维素酶对葵花脱脂粕的酶促反应动力学参数,求出其米氏常数,为改进酶解法提取葵花脱脂粕中绿原酸提供理论参考。