目的观察褪黑素对小鼠前胃癌细胞MFC增殖和凋亡的影响，并通过荷胃癌小鼠模型研究褪黑素对癌基因c-Myc和抑癌基因p53表达的影响，探讨褪黑素抑制肿瘤的一些可能机制。方法1.建立小鼠前胃癌细胞株MFC褪黑素干预模型：MFC细胞传代培养后，按不同浓度褪黑素干预不同时间分组，分别为：0mM、2mM、4mM、6mM、8mM组（24h）；0mM、2mM、4mM、6mM组（48h）；0mM、2mM、4mM组（72h）。观察细胞形态变化，并进行后续研究。2.建立荷胃癌小鼠模型：选用615近交系小鼠，MFC细胞计数后，按5×105个细胞/小鼠，右腋皮下注射，一周后，荷瘤模型建立成功，给予不同浓度褪黑素干预一周：A、荷瘤空白对照组：荷瘤成功后每天腹腔注射生理盐水100mg/kg；B、褪黑素低剂量组（25mg/kg）；C、MLT中剂量组（50mg/kg）；D、MLT高剂量组（100mg/kg）。3.应用免疫细胞化学染色方法定位细胞c-Myc和p53蛋白的表达。4.应用实时荧光定量PCR比较分析褪黑素干预后各组细胞及肿瘤组织中c-Myc和p53mRNA表达量的变化。5.应用蛋白免疫印迹（Western bolt）技术和图像分析软件分析褪黑素干预后各组细胞及肿瘤组织中c-Myc和p53蛋白表达量的变化。6.应用免疫组织化学方法定量检测肿瘤组织中c-Myc和p53蛋白表达量的变化。结果1.不同浓度褪黑素不同时间干预下各组胃癌细胞生长受到抑制，形态变化明显，凋亡增加。2.免疫细胞化学显示，小鼠前胃癌细胞MFC中c-Myc、p53均在胞核表达，c-Myc在胞浆中也有表达。3.实时荧光定量PCR结果显示：与对照组相比，各褪黑素干预组MFC肿瘤细胞中c-Myc mRNA表达减少，除2mM（48h）组外，各组均有显著性差异；p53mRNA表达增加，各组均有显著性差异。与对照组相比，各褪黑素干预组肿瘤组织中c-Myc mRNA表达减少，各组均有显著性差异；p53mRNA表达增加，各组均有显著性差异。4. Western bolt结果显示：与对照组相比，各褪黑素干预组MFC肿瘤细胞及肿瘤组织中c-Myc蛋白表达均减少，除低剂量组外各组均有显著性差异；各褪黑素干预组肿瘤细胞p53蛋白表达减少，除2mM组（24、48h）、4mM组（48h）外，各组均有显著性差异。而与对照组相比，各褪黑素干预组肿瘤组织中p53蛋白表达增加，除低剂量组外，各组均有显著性差异。5.免疫组化结果显示：与对照组相比，褪黑素各干预组肿瘤组织中c-Myc阳性蛋白平均光密度值减少，各组均有显著性差异；p53阳性蛋白平均光密度值增加，与对照组相比，各组均有显著性差异。结论小鼠前胃癌细胞MFC经不同浓度褪黑素干预24h、48h、72h后，肿瘤细胞生长受到抑制，出现凋亡，大致呈剂量依赖性；同时，癌基因c-Myc的转录、翻译、表达水平都有不同程度的下调，而抑癌基因p53的转录、翻译、表达水平都有不同程度的上调，大体呈剂量依赖性。肿瘤组织中有相似变化，表明褪黑素具有下调c-Myc、上调p53表达的作用。褪黑素下调癌基因c-Myc、上调抑癌基因p53的表达，可能是其抗肿瘤的作用机制之一。