论文部分内容阅读
“肝应春,主疏泄、调节情志”是“五脏应时”理论的重要内容,也是中医“天人相应”思想的重要体现。正确认识“肝主疏泄、调节情志”内容的本质,了解其“应时而变”的时间共振调控机制是“肝应春”理论内涵研究的重要内容之一,对于充实和深化肝藏象本质研究具有重要意义。1目的通过将中医“肝应春,主疏泄、调节情志”理论依据与现代褪黑素(melatonin,MT)、下丘脑-垂体-肾上腺轴-海马相结合,揭示“肝应春,主疏泄、调节情志”的科学内涵,为情志病的季节性发作或加重提供预防及治疗的理论及实验依据。2方法2.1理论研究采用文献资料搜集及逻辑演绎分析的方式,对中医“肝应春,主疏泄、调节情志”的理论源流进行梳理,从生理和病理角度阐述其内涵的科学性。同时,对现代神经内分泌理论进行研究,探讨中医“肝应春,主疏泄、调节情志”的调控机制的现代生理学基础,为动物实验研究提供可行的理论依据。2.2实验研究2.2.1实验设计本实验以二分二至(春分、秋分、夏至、冬至)为时间点,选取5周龄SD雄性大鼠,观察时令季节对不同状态下(生理组、手术组、伪手术组)相关激素及单胺类神经递质—褪黑素(MT)、促肾上腺皮质激素释放因子(corticotropin-releasing factor,CRF)、肾上腺皮质激素释放激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮(corticosterone,CORT)、5-羟色胺(serotonin,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的浓度变化,探讨时令季节变化对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴-海马、松果腺神经内分泌相关指标的影响,以及褪黑素对海马以及下丘脑-垂体-肾上腺轴的调控和影响。2.2.2实验动物健康5周龄SD雄性大鼠,体重150g～170g,分别在二分二至(春分、秋分,夏至、冬至)前35天购入。将大鼠随机分为生理组、手术组(摘除松果腺)、伪手术组(不摘除松果腺),每组8只。手术组、伪手术组分别于二分二至前30天完成造模,与生理组大鼠在相同条件下饲养,分别于二分二至四个时间点进行实验取材。饲养条件:自然光照条件下,湿度:50%～60%,室温饲养(冬季为:17±2℃,夏季为25±2℃)。分别于二分二至当天傍晚将实验大鼠全部移至暗室内,于夜间21:00以后取材。2.2.3指标检测四季血清MT、CRF、ACTH、CORT水平,海马组织中5-HT、DA、NE水平。其中,采用放射免疫法(radioimmunoassay,RIA)检测 MT、CRF、ACTH、CORT;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测 5-HT、DA、NE。2.2.4统计分析方法各组数据结果均以均数±标准差(X±s)形式表示,运用GraphPadPrism6.0统计软件分析。各组数据之间符合正态分布且满足方差齐性者,运用单因素方差(one-way ANOVA)进行分析;数据不呈正态分布,则选用非参数检验中Mann-WhitneyU检测方法进行检验,若数据方差齐性不能满足,则使用Welch法进行统计分析。两组间比较时,若方差齐性及数据正态分布均能满足者,则采用独立样本T检验进行数据分析。以P<0.05认为实验差异有意义。3结果3.1在正常的生理状态下,褪黑素的血清浓度随着自然界光照长度的变化而呈现节律性改变,表现为夏季最低,冬季最高,春秋两季居中的节律。3.2正常生理状态下,HPA轴总趋势是春、冬季节较高,夏、秋季节降低。其中,CRF春季最高,冬季较高,秋季最低;ACTH秋季最高,春季最低;CORT冬季最高,春季其次,秋季最低。3.3正常生理状态下,海马与精神状态密切相关的神经递质有一定季节节律。其中,5-HT春季最高,夏季最低。DA冬季最高,春季最低。NE冬季最高,秋季最低。3.4松果腺-褪黑素四季对于HPA轴和海马神经递质具有一定的调节作用。如对HPA轴而言:摘除松果腺后,春季CRF、ACTH升高:夏季ACTH升高,CORT降低;秋季CRF降低,CORT升高;冬季CRF降低,ACTH升高。对神经递质而言:摘除松果腺后,春季5-HT、NE降低;夏季DA升高;秋季5-HT、DA降低;冬季DA、NE降低。春季摘除松果腺上调了 HPA轴活性(CRF、ACTH含量上调),下调了 5-HT、NE含量。4结论4.1 HPA轴激素和海马中单胺类神经递质的分泌具有一定的季节节律性。4.2 HPA轴与海马中单胺类神经递质的季节节律性变化与松果腺-褪黑素密切相关。褪黑素对HPA轴和海马神经递质的调节具有季节选择性、层次选择性、调节程度差异性及调节机制的双向性。4.3“肝应春,主疏泄、调节情志”理论具有科学内涵,其调节机制可能是通过松果腺-褪黑素的季节性分泌影响HPA轴和海马神经递质的季节性改变而实现的,这也许是季节性情感障碍(SAD)季节性发病的生理病理机制之一。