第一部分 LC-MS/MS测定大鼠血浆中利伐沙班浓度及那格列奈对利伐沙班药动学的影响　　目的:创建LC-MS/MS法测定血浆利伐沙班浓度，研究大鼠血浆中利伐沙班浓度及那格列奈对利伐沙班药动学的影响，为临床两药联合应用提供理论基础。　　方法:色谱、质谱条件:色谱柱:Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm，5μm);选用API4000+型三重四级杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测;在正离子模式下的电喷雾离子源;选择监测离子反应分别为m/z436.2→145.2（利伐沙班）和m/z370.1→278.0（艾瑞昔布）;流动相:10 mmoL/L的醋酸铵(pH=3.14)-乙腈(50∶50，V/V);流速:0.8 ml/min;柱温:30℃;样本进样量:20μl;内标:艾瑞昔布。　　将36只健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组，每组18只，实验组每天灌胃那格列奈混悬液(12 mg/kg)3次，对照组每天灌胃等体积的空白混悬液3次，连续3天。第4天早晨在实验组和对照组分别灌胃那格列奈和空白混悬液30 min后，每只大鼠灌胃利伐沙班混悬液(2.6mg/kg)，并于灌胃利伐沙班前(0 h)和灌胃利伐沙班后10、20、30、45min、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24 h眼内眦取血，血浆样品处理后用LC-MS/MS法测定，选用DAS2.1.1药动学软件拟合药动学参数，并用SPSS17.0统计学软件对两组大鼠的药动学参数进行统计学分析。　　结果:实验组与对照组主要药动学参数:AUC0-1分别为(2572.67±1017.61)μg·h/L和（1692.75±654.72）μg·h/L; AUC0-∞分别为（2713.29±1101.60）μg·h/L和（1760.25±649.11）μg·h/L;t1/2分别为(4.00±1.48)h和（3.46±1.10）h;Tmax分别为(0.86±0.15)h和(0.69±0.20)h;CL分别为（1.11±0.43）L/(h·kg)和（1.68±0.60）L/(h·kg);V分别为（5.80±1.63）L和（7.95±2.74）L;Cmax分别为（537.83±141.35）μg/L和(438.19122.02)μg/L;结果表明:实验组的t1/2与对照组相比无显著差异(P＞0.05)，AUC0-t、 AUC0-∞、Cmax、Tmax明显增加，有显著性差异(P＜0.05)，CL、V、明显减小，有显著性差异(P＜0.05)。　　结论:本实验所建立的LC-MS/MS法测定大鼠血浆中利伐沙班浓度，方法简便易行、灵敏度高、重现性好，适用于大鼠血浆中利伐沙班浓度的测定及体内药代动力学研究;那格列奈与利伐沙班联合用药后，那格列奈可显著增加大鼠体内利伐沙班的吸收程度，并使利伐沙班的消除速度减慢。　　第二部分那格列奈对利伐沙班在大鼠体内药效学的影响　　目的:考察那格列奈对利伐沙班在大鼠体内药效学的影响　　方法:将18只SD大鼠随机分为3组，每组6只，分别为利伐沙班组、那格列奈组、利伐沙班+那格列奈组（合并用药组）。利伐沙班组于每天灌胃利伐沙班混悬液(2.6 mg/kg)1次和与那格列奈组等体积的空白混悬液3次;那格列奈组于每天灌胃那格列奈混悬液(12 mg/kg)3次和与利伐沙班组灌胃等体积的空白混悬液1次;合并用药组于每天同时给予同等剂量那格列奈混悬液3次和利伐沙班混悬液1次;利伐沙班组、那格列奈组及合并用药组均连续给药5天。每只大鼠第一次给药前取空白血，之后分别在每天给药后45 min大鼠眼内眦取血1.5～2ml于3ml真空抗凝管中，3000 r/min离心5 min，使用贝克曼·库尔特全自动凝血分析仪，分别测定利伐沙班组、那格列奈组和合并用药组的重要药效学参数凝血酶原时间（Prothrombin time，PT）和活化部分凝血酶时间(Activated partialthromboplastin time，APTT)，国际标准化比值(Internationalnormalizedration，INR)，所有数据进行方差分析。　　结果:三组主要药效学参数:那格列奈组药效学参数PT、APTT及INR值均无统计学差异(P＞0.05);利伐沙班组和合并用药组药效学参数统计APTT值无显著差异(P＞0.05)，但两组药物的PT、INR值均比治疗前显著增加(P＜0.05);利伐沙班组与合并用药组两组间同时期测得的药效学参数PT、APTT、INR值均无统计学差异(P＞0.05)。　　结论:利伐沙班与那格列奈联合应用后，利伐沙班在大鼠体内的药效学参数无显著变化，表明大鼠体内那格列奈对利伐沙班的药效学尚无影响。