马尾松毛虫去毒技术及功能性油脂的制备研究

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马尾松毛虫不仅蛋白质含量很高,其虫体油脂中的功能性多不饱和脂肪酸含量也较高。对马尾松毛虫中的多不饱和脂肪酸进行开发利用,可以增加功能性脂肪酸的来源,同时可将松毛虫资源变害为宝,具有重要的研究价值。但由于马尾松毛虫具有毒毛,使得其资源开发受到了限制,因此,研究一种简便有效的去除毒素的方法,是松毛虫相关产品开发利用的基础。本文在实验室前期研究的基础上,研究了马尾松毛虫毒素的基本性质和部分药理作用、获得了一种通过简单热处理去除毒素活性的方法;并对去毒后的马尾松毛虫进行了油脂的提取,初步浓缩了其中的多不饱和脂肪酸,获得了α-亚麻酸含量较高的松毛虫功能性油脂。主要研究结果如下:采用家兔皮肤刺激试验法对马尾松毛虫幼虫毒素的无水乙醇粗提物,蒸馏水粗提物、乙酸乙酯粗提物,乙酸粗提物和磷酸缓冲液粗提物,以及生物碱提取物进行了检测,发现毒素较易溶解于极性较大的无水乙醇,可溶于蒸馏水,但不溶乙酸乙酯,乙酸、稀盐酸和磷酸缓冲液。毒素的主要活性成分非虫类毒素常见的多肽类、生物碱或胺类成分:毒素在0-60℃时有较好的热稳定性,但在100℃下可完全失活。纸片扩散试验法测试马尾松毛虫毒素醇提物的抑菌结果表明:马尾松毛虫毒素醇提物对大肠杆菌,酿酒酵母,枯草芽孢杆菌,黑根霉,金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用,其中对大肠杆菌的抑制作用最强,对金黄色葡萄球菌的抑制作用最弱。马尾松毛虫毒素的最佳去毒方法是单纯热处理法。随着温度的升高,毒素活性显著降低,100℃处理2小时后,采用家兔皮肤刺激试验法未检测出皮肤刺激毒性。进一步对经100℃处理2小时后的马尾松毛虫样品采用急性经口毒性试验,Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,以及小鼠精子畸形试验等进行了安全毒理学评价。结果表明,昆明种雌、雄小鼠的急性经口LD50均大于7500mg/kg-bw,3项遗传毒性试验结果均为阴性,说明检测样品属实际无毒级,且未见遗传毒性作用,表明单纯热处理法是一种简便可行的马尾松毛虫毒素的的灭活方法。采用闪式提取法对去毒后的马尾松毛虫幼虫粗脂肪进行了提取。结果表明,固液比、提取时间和提取电压对粗脂肪提取的影响显著。最佳闪式提取工艺为固液比为1:50,提取时间为1.5min,提取电压为75v;在此条件下,粗脂肪提取率为95.39%。进一步研究了硝酸银络合萃取法浓缩马尾松毛虫α-亚麻酸的技术,得到的最佳工艺条件为:络合液为45%的硝酸银溶液(以40%的甲醇水溶液为溶剂),反应温度为0℃,络合萃取时间为1.5h,在此条件下,α-亚麻酸的纯度由原油的15.32%提高到22.43%,提高了46.4%。为α-亚麻酸的进一步优化提取和大量制备提供了技术基础。
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