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目的:目前全球性的传染性疾病有很多种,如艾滋病、病毒性肝炎、流行性感冒、结核病等,其中结核病是常见且严重危害人类健康的一种慢性传染性疾病,快速有效的早期诊断技术是结核病预防及治疗的前提。本研究以结核病人和健康人血清中的微小RNA(microRNAs)为研究对象,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测结核病人与健康人血清中microRNAs的表达量,找到稳定差异表达的microRNAs分子,从而建立以microRNAs为检测靶标的新型结核病检测方法,以期开发出结核病的新型诊断技术。方法:本研究首先利用qRT-PCR方法检测了50例结核病人与50例健康人血清中与结核病高度相关的六种microRNAs分子(miR-29a,miR-93*,miR-320b,miR-144*,miR-21,miR-155)的表达量情况,找到稳定差异表达的有统计学意义的microRNAs分子。然后根据筛选结果,采用qRT-PCR方法对筛选出的稳定差异表达的microRNAs分子进行样本验证;同时利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对样本进行检测,将两种方法的检测结果进行比较,讨论microRNAs分子是否有潜力作为结核病的新型生物诊断标志物应用于临床,从而评估以microRNAs为靶标的新型结核病检测方法的临床研发价值。结果:1.结核病人与健康人血清中miR-29a的表达量存在极显著差异;miR-320b的表达量存在显著差异;其它4种microRNAs(miR-93*,miR-21,miR-155,miR-144*)的表达量差异不显著。2.对miR-29a的荧光定量PCR反应体系进行优化,确定最佳模板浓度为5倍稀释的反转录cDNA;最适引物终浓度为0.2μM,建立了以miR-29a为靶标的结核病新型检测方法。3.以miR-29a为靶标的结核病检测方法阳性检测率为94%;ELISA方法的阳性检测率为89%。结论:结核病人与健康人血清中miR-29a的表达量存在极显著差异;建立了以miR-29a为靶标的结核病新型检测方法;该检测方法对结核病的检测效果较好。