利用酵母双杂交系统筛选并鉴定出与MCM4C末端结构域(MCM4-CTD)相互作用的蛋白

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DNA复制的严谨性和准确性对于遗传信息的传递有重要的作用,微小染色体维持蛋白复合物(MCM complex)是由六个亚基组成的六聚体,在真核细胞的DNA复制过程中起解旋酶的作用。在DNA损伤(DNA damage)时,复制叉会停止,过度的解旋会产生过多的单链DNA(ssDNA)从而能引起复制叉及整个基因组的不稳定。研究发现,MCM复合物中的一个最保守的亚基MCM4的C末端结构域(MCM4-CTD),其编码基因的大小为648bp,可以调控整个MCM复合物,在停止的复制叉处阻止它过度解旋,防止产生过多的单链DNA,这就预示着在DNA损伤时存在DNA损伤反应过程中相关的MCM4-CTD的重要作用。我们利用酵母双杂交实验,将MCM4-CTD克隆到BD载体上,从酵母的cDNA文库中筛选并鉴定出与之相互作用的蛋白SNF12,它是染色体重塑蛋白复合物(chromatin remodeling complex)SWI/SNF中的一个亚基。由此我们推测出在DNA损伤反应的过程中,染色体的重塑活性也参与到DNA复制的调控中。
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