【摘 要】
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目的:观察MTH1小分子抑制剂TH287对胃癌细胞的抑制作用,探讨其潜在机制。方法:体外培养胃癌细胞株BGC-823和SGC-7901,用不同浓度MTH1抑制剂TH287处理胃癌细胞。采用CCK-8法和
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目的:观察MTH1小分子抑制剂TH287对胃癌细胞的抑制作用,探讨其潜在机制。方法:体外培养胃癌细胞株BGC-823和SGC-7901,用不同浓度MTH1抑制剂TH287处理胃癌细胞。采用CCK-8法和克隆形成实验检测BGC-823和SGC-7901细胞增殖;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪和线粒体膜电位检测细胞凋亡水平;流式细胞术测定细胞周期;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。AKT磷酸化激活剂SC79预处理胃癌细胞验证TH287对胃癌细胞PI3K/AKT信号通路的作用。结果:CCK-8检测结果显示,TH287抑制BGC-823和SGC-7901细胞存活率,效果呈剂量和时间依赖性(P<0.05)。克隆形成实验结果显示,随着药物浓度的增加,细胞克隆形成数减少。划痕实验和Transwell实验结果显示,随着TH287浓度增加,BGC-823和SGC-7901细胞迁移能力下降(P<0.05)。Annexin-Ⅴ/PI双染实验和线粒体膜电位检测结果显示,TH287诱导BGC-823和SGC-7901细胞凋亡增加和线粒体膜电位下降(P<0.05);细胞周期测定结果显示,TH287诱导胃癌细胞G2/M周期阻滞(P<0.05)。Western blot结果显示,TH287诱导凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值下降(P<0.05),并且诱导PI3K表达降低,AKT磷酸化水平下降(P<0.05)。AKT磷酸化激活剂预处理细胞结果显示,TH287对胃癌的抑制作用减弱,细胞凋亡减少。结论:MTH1抑制剂TH287能够抑制BGC-823和SGC-7901细胞增殖及迁移,诱导胃癌细胞发生G2/M周期阻滞。并且可能通过调控PI3K/AKT信号通路调控BGC-823和SGC-7901细胞凋亡。
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