【摘 要】
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目的:脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI）致小胶质细胞（microglia,MG）激活,极化为M1促炎表型或M2抗炎表型,发挥加重损伤或促进组织修复的双重作用。转位蛋白18k Da（translocator protein,TSPO）在中枢神经系统损伤或炎症中表达明显上调,是MG激活标记物。然而目前对CIRI中TSPO与小胶质细胞极
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目的:脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI）致小胶质细胞（microglia,MG）激活,极化为M1促炎表型或M2抗炎表型,发挥加重损伤或促进组织修复的双重作用。转位蛋白18k Da（translocator protein,TSPO）在中枢神经系统损伤或炎症中表达明显上调,是MG激活标记物。然而目前对CIRI中TSPO与小胶质细胞极化作用之间的调控关系及机制尚不清楚。方法:本研究在体内实验中,采用大鼠大脑中动脉闭塞模型（middle cerebral artery occlusion,MCAO）诱导局灶性脑缺血再灌注损伤,分别在术前48h、术前24h及缺血后30min分次腹腔注射TSPO配体PK11195溶液（1ml/kg）。LONGA评分、TTC染色、HE染色评估神经功能损伤。体外实验中,通过Crisper/Cas9技术构建BV2细胞系TSPO过表达和敲减稳定株,再分别予以缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）处理。免疫组织化学染色、Western blot和q PCR检测M1表型标志物（CD86、IL-1β、TNF-α）和M2表型标志物（CD206、IL-10、TGFβ）及TSPO的表达。CCK8检测BV2细胞系TSPO过表达和敲减稳定株在细胞H/R后的细胞活力。结果:PK11195明显改善大鼠MCAO后的神经功能损伤,并有小胶质细胞M1极化标志物的表达减少,而M2极化标志物的表达增加。体外研究证实:H/R引起M1和M2型标志物表达均明显升高,并显著降低BV2细胞活力。TSPO过表达抑制H/R导致的M1型标志物的增加,并上调M2型标志物的表达,并增强细胞活力。另外一方面,H/R条件下TSPO敲减上调M1型标志物的表达,并抑制M2型标志物的增加,同时显著提高细胞活力。结论:CIRI中,TSPO可影响和调控小胶质细胞极化,从而改善神经功能损伤。
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