【摘 要】
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人源诺如病毒(Human noroviruses, HuNoVs)是引起人类非细菌性肠胃炎的主要病原。果蔬(如生菜、草莓类)表面可吸附HuNoVs,是其重要传播的载体之一。但是,鲜见果蔬中病毒受体
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人源诺如病毒(Human noroviruses, HuNoVs)是引起人类非细菌性肠胃炎的主要病原。果蔬(如生菜、草莓类)表面可吸附HuNoVs,是其重要传播的载体之一。但是,鲜见果蔬中病毒受体、病毒传播等与污染和传播机制相关的信息。因此,探索果蔬中HuNoVs的分布规律,分析HuNoVs受体及其性质,是揭示果蔬传播HuNoVs机制的突破口。在前期工作的基础上,本研究以表面展示HuNoVs (GⅠ.1/GⅡ.4)衣壳蛋白P结构域的大肠杆菌[INP-P(GⅠ.1/GⅡ.4)BL21]为HuNoVs替代物,以激光共聚焦荧光显微镜,分析了生菜表面HuNoVs受体的结合和分布情况;并以ELISA方法,对生菜叶提取物中病毒受体类型及性质做了初步分析。结果如下:(1)以激光共聚焦荧光显微镜分析生菜叶面吸附INP-P(GⅠ.1/GⅡ.4)BL21的规律。结果发现:老生菜叶的叶面、叶脉和气孔处易吸附HuNoVs;相应地,新叶吸附病毒能力较差。(2) ELISA对生菜叶提取液中病毒类受体进行检测,结果发现:唾液和PGM处理可以特异性抑制INP-P(GⅠ.1/GⅡ.4)BL21与生菜叶提取物的结合;NaIO4可以显著性抑制INP-P(GⅠ.1/GⅡ.4)BL21同生菜叶提取液的结合。生菜叶提取物煮沸后,可部分抑制与INP-P(GⅡ.4)BL21的结合。因此,HuNoVs与生菜叶提取物结合的介质为类HBGAs糖蛋白,且结合的主要成分为多糖基团;GⅡ.4型HuNoV可特异性结合生菜叶提取物中的蛋白质,但GⅠ.1型HuNoV没有该现象。(3) pH对HuNoVs同生菜的结合影响小。离子间力和疏水作用在HuNoVs与生菜互作过程中有重要作用。
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