目的:　　 体外分离培养奶牛MaSCs，研究其生物学特性，并对其进行体外扩增和鉴定，开辟奶牛乳腺疾病治疗的新途径，为乳腺生物反应器的制备提供种子细胞。　　 方法:　　 本试验分为三个部分:试验一分离MaSCs，并进行原代和传代培养纯化，绘制其生长曲线和瑞氏-吉姆萨(RS-GMS)染色来研究其生物学习性，并对细胞进行冻存和复苏。试验二取6月龄和18月龄奶牛乳腺组织分离培养MaSCs，比较其生长特点及增殖能力。试验三对分离培养并传代纯化的MaSCs通过碱性磷酸酶（AKP）染色、染色体核型分析和αs1-酪蛋白基因和k-酪蛋白基因的PCR扩增来进行鉴定。　　 结果:　　 1.本试验应用贴壁筛选法成功分离得到奶牛MaSCs，体外培养到第12代，细胞数量扩增到5000倍以上。本试验分离得到的奶牛MaSCs具有干细胞的典型特征:外形呈多角形、长梭形或椭圆形，细胞核质比较大、胞浆中细胞器少、核仁明显。奶牛MaSCs具有快速增殖能力，细胞形态均一，排列有序，体外培养12代细胞活性仍无变化。　　 2.6月龄组牛MaSCs增殖能力、贴壁能力、培养形成的细胞集落数均高于18月龄组。　　 3.瑞氏-吉姆萨(RS-GMS)染色证明奶牛MaSCs各代之间形态较一致，绝大多数细胞为典型的成纤维样，细胞呈漩涡状排列，细胞形态以梭形为主，有少量小圆形细胞和大而扁的细胞。　　 4.碱性磷酸酶(AKP)染色细胞呈阳性，证明所得细胞为比较原始的细胞。　　 5.奶牛MaSCs核型分析表明该细胞具有正常核型，该细胞状态稳定，体外培养条件下没有发生恶化。　　 6.奶牛MaSCsαs1-酪蛋白扩增的产物经琼脂糖凝胶电泳检测，得到一条长1736bp的片段，k-酪蛋白基因酪蛋白基因扩增出一条长度为780bp的目的条带，扩增片段特异性良好，无杂带出现，目的片段的大小与预期结果相吻合。　　 综上所述，本试验分离得到的奶牛MaSCs的确为比较原始的细胞，根据形态特征、增殖能力、及鉴定试验基本证明该细胞为奶牛MaSCs。