阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞和大鼠胸主动脉平滑肌细胞Adropin相关基因及蛋白表达的影响

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第一部分阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞Adropin相关基因及蛋白表达的影响目的探讨阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞(human umbilical endothelial cell, HUVEC)Adropin相关基因及蛋白表达的影响。方法将不同浓度的阿托伐他汀(0.002umol/l、0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l)与HUVEC共培养6小时(hour,h)、12h、24h。采用MTT法检测HUVEC的增殖情况。半定量逆转录聚合酶链反应法检测HUVEC Adropin mRNA的表达。ELISA法测定细胞上清液中Adropin蛋白的表达。结果1.不同浓度的阿托伐他汀与HUVEC共培养6h时,20umol/l浓度组增殖活力明显高于对照组(P<0.05),其他各浓度组差异无统计学意义。共培养12h时,0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l浓度组细胞活力显著高于对照组(P<0.05),0.2umol/l、2umol/l、20umol/l浓度组活力显著高于0.002umol/l浓度组(P<0.05)。共培养24h时,各浓度组细胞活力均显著高于对照组(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l浓度组活力显著高于0.002umol/l浓度组(P<0.05)。同一浓度阿托伐他汀分别与HUVEC共培养6h、12h、24h,12h和24h组活力明显高于6h组(P<0.05)。2.不同浓度组阿托伐他汀与HUVEC共培养6h、12h、24h后,Adropin mRNA的表达均显著高于对照组(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l浓度组Adropin mRNA的表达显著高于0.002umol/l组(P<0.001)。同一浓度阿托伐他汀分别与HUVEC共培养6h、12h、24h,12h和24h组mRNA表达量明显高于6h组(P<0.01)。3.不同浓度的阿托伐他汀与HUVEC分别共培养6h、12h、24h,各浓度组HUVEC上清中Adropin蛋白的表达显著高于对照组(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l浓度组Adropin蛋白的表达显著高于0.002umol/l组(P<0.001)。同一浓度阿托伐他汀分别与HUVEC共培养6h、12h、24h时,12h和24h组蛋白表达量明显高于6h组(P<0.001)。4. Adropin蛋白含量与HUVEC吸光度值(OD值)进行Pearson相关性分析显示不同时间段各浓度组adropin与OD值呈显著正相关(6h,相关系数r=0.471,P=0.049;12h,r=0.756,P=0.001;24h,r=0.725,P=0.001)。结论1.阿托伐他汀能够促进HUVEC的增殖,并呈剂量和时间依赖性。2.阿托伐他汀能够促进HUVEC Adropin相关基因及蛋白的表达,且呈剂量和时间依赖性。3. HUVEC的增殖活力与其Adropin蛋白的表达呈正相关。第二部分阿托伐他汀对大鼠胸主动脉平滑肌细胞Adropin相关基因及蛋白表达的影响目的探讨阿托伐他汀对大鼠胸主动脉平滑肌细胞(rat aortic smooth muscle cell,RASMC)Adropin相关基因及蛋白表达的影响。方法原代培养SD大鼠的RASMC,免疫荧光和免疫细胞化学染色法进行鉴定,取4-5代细胞进行试验。.不同浓度的阿托伐他汀(0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l)与RASMC分别共培养6h、12h、24h。采用MTT法检测RASMC的增殖情况。半定量逆转录聚合酶链反应法检测RASMCAdropin mRNA的表达。ELISA法测定细胞上清液中Adropin蛋白的表达。结果1.不同浓度的阿托伐他汀与RASMC共培养24h时,各浓度组细胞活力显著低于对照组(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l阿托伐他汀组活力明显高于20umol/组(P<0.05)。同一浓度阿托伐他汀与RASMC共培养6h、12h、24h,12h和24h组活力明显低于6h组(P<0.05)。2.不同浓度的阿托伐他汀与RASMC共培养,各浓度组Adropin mRNA表达量均高于对照组(P<0.05);随着浓度增大,细胞中Adropin mRNA表达量逐渐降低(P<0.05)。同一浓度阿托伐他汀分别与RASMC共培养6h、12h、24h,12h和24h组AdropinmRNA表达量明显高于6h组(P<0.01)。3.不同浓度的阿托伐他汀与RASMC分别共培养6h、12h、24h,各浓度组RASMC上清中Adropin蛋白的表达显著高于对照组(P<0.05)。随着浓度增大,细胞中Adropin蛋白的表达量逐渐降低(P<0.05)。同一浓度的阿托伐他汀分别与RASMC共培养6h、12h、24h,Adropin蛋白的表达量随着时间延长明显增加(P<0.05)。4. Adropin蛋白含量与RASMC吸光度值(OD值)进行Pearson相关性分析显示不同时间段各浓度组adropin与OD值呈显著正相关(6h,相关系数r=0.694,P=0.012)vs(12h,r=0.697,P=0.002) vs(24h,r=0.826,P=0.001)。结论1.阿托伐他汀能抑制RASMC的增殖并呈剂量和时间依赖性。2.阿托伐他汀能促进RASMC Adropin相关基因及蛋白的表达,但随浓度的增加其促进作用逐渐减弱。3. RASMC的增长活力与其Adropin蛋白的表达呈正相关。
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