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目的:通过构建周细胞条件敲除Senp1的小鼠(Cspg4-Cre;Senp1f/f),结合玫瑰红光栓局部脑缺血模型(Rose Bengal Local Ischemia Model),探索周细胞中SENP1在脑缺血病理过程中的作用,为脑缺血的防治提供理论依据和药物治疗新靶标。方法:(1)利用Cre-LoxP系统,通过spg4-Cre小鼠和Senp1f/-f小鼠交配得到Cspg4-Cre;Senp1f/f目的小鼠用于研究。通过检测神经元密度考察周细胞条件敲除Senp1后对神经元数量的影响;采用转棒和Y-Maze行为学考察周细胞条件敲除Senp1对小鼠运动能力和学习记忆的影响。(2)采用玫瑰红光栓法在小鼠躯体感觉皮层建立局部脑缺血模型,通过检测梗死体积,缺血梗死区以及半影区神经元密度,考察周细胞条件敲除Senp1后局部脑缺血的损伤程度。(3)在脑局部缺血24h后对小鼠进行转棒,Y-Maze行为学测试,考察周细胞条件敲除Senp1在局部脑缺血24h后对小鼠运动能力以及学习记忆的影响。(4)通过双光子活体成像脑血管3D重构技术和线扫描技术检测大脑皮层的血管密度、血流速度、直径、灌注量,考察周细胞条件敲除Senp1对脑血管基本特性影响;通过检测脑局部缺血后3h,6h,24h半影区血管栓塞程度,考察周细胞条件敲除Senp1后,对缺血后脑血管栓塞的影响。(5)采用Western Blot检测缺血24h后含缺血部位皮层区的血影蛋白(Spectrin),钙调神经磷酸酶(Calcineurin)蛋白裂解片段表达量,考察周细胞敲除Senpl后对脑内神经血管单元的损伤程度;通过检测脑缺血半影区的周细胞形态,探究周细胞条件敲除Senp1对周细胞形态的影响。结果:(1)周细胞条件敲除Senp1后,不改变小鼠的神经元数量、运动能力以及学习记忆功能没有改变。(2)周细胞条件敲除Senp1的小鼠脑局部缺血后,梗死体积增大;缺血梗死区以及半影区神经元密度减少。(3)周细胞条件敲除Senp1的小鼠局部脑缺血24h后运动能力下降,学习记忆无明显改变。(4)周细胞条件敲除Senp1后皮层血管密度、直径、血流流速、血液灌注量无差异。但在脑局部缺血后,小鼠脑血管堵塞程度较对照小鼠明显加重,并且有时间依赖性。(5)周细胞条件敲除Senp1的小鼠在局部脑缺血后,脑缺血后神经血管损伤标志物血影蛋白(Spectrin)和钙调神经磷酸酶(Calcineurin)蛋白活性裂解片段表达量增多,缺血半影区周细胞尾足断裂严重。结论:通过玫瑰红光栓局部脑缺血模型结合周细胞条件敲除Senp1基因小鼠,发现Senp1基因对血管-周细胞单元以及神经功能影响,表明周细胞中SENP1在脑局部缺血中发挥重要作用。