本研究以一株具有优良发酵特性的Pediococcus acidilactici IMAU95219为研究对象,采用单因素筛选试验、复配试验和响应面设计,对培养基配方、静态培养条件和高密度发酵工艺进行优化,提高P.acidilactici IMAU95219高密度发酵液的活菌数,为P.acidilactici IMAU95219微生态制剂工业化生产提供理论依据,试验结果如下:(1)以MRS培养基为基础,通过碳源、氮源、碳氮总量及比例、缓冲盐体系、微量元素和生长因子的筛选,得到P.acidilactici IMAU95219最适培养基为:葡萄糖35.16 g/L,酵母浸粉48.33 g/L,酵母蛋白胨16.11 g/L,磷酸氢二钾5.16 g/L,乙酸钠12.88 g/L,柠檬酸钠5.16 g/L,硫酸镁1.20 g/L,硫酸锰0.01 g/L,维生素B2 0.50 g/L、吐温-80 1.00 g/L。(2)P.acidilactici IMAU95219的最佳静态培养条件:初始pH值6.5,接种量5%,培养温度30℃,需氧培养24 h,发酵液活菌数可达(6.93±0.29)×109 CFU/mL,较优化前MRS培养基的活菌数(4.08±0.77)×109CFU/mL提高1.69倍。(3)采用5 L发酵罐进行高密度发酵试验,得到最佳高密度培养工艺:选取质量分数为25%的氨水作为中和剂、恒pH值5.9,在5 L发酵罐中进行高密度发酵,菌体生长速度明显加快、菌体密度显著提高,发酵液活菌数可达(1.01±0.07)×1010 CFU/mL。