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[目的]为研究HepG2肝癌细胞株miRNA-221、miRNA-222和miRNA-92b与p57kip2mRNA表达关系,进一步阐明p57kip2基因上游的调控机制及其在肝癌发生发展中的作用。本文拟探讨三种miRNA与p57kip2mRNA转录水平调控关系,开拓肝癌的未知领域,为肝癌临床诊疗研究提供新的细胞分子生物学依据。[方法]体外培养HepG2细胞和QSG-7701细胞,利用荧光定量PCR方法检测两种细胞中miRNA-221、miRNA-222和miRNA-92b的表达量。分别运用三种miRNA的抑制剂转染HepG2肝癌细胞株,荧光标记siRNA评估转染效率。转染24小时后MTT法检测细胞活性,RT-PCR检测p57kip2mRNA的表达,分析三种miRNA与p57kip2mRNA表达的关系。[结果](1)荧光定量PCR结果：HepG2细胞中miRNA-221、miRNA-222和miRNA-92b均有表达,但表达量均低于QSG-7701细胞。miRNA-221:t=-3.145,p=0.035<0.05,差异有统计学意义；miRNA-222:t=-6.875, p=0.021<0.05,差异有统计学意义；miRNA-92b:t=-7.722, p=0.016<0.05,差异有统计学意义。(2)转染效率的检测结果：荧光标记的siRNA转染HepG2细胞在转染四个时间段的转染效率都在90%以上。(3)MTT法检测结果：三种miRNA抑制剂转染HepG2细胞24小时后明显降低HepG2细胞的活性。空白对照组和阴性对照组比较：p=0.546>0.05,差异无统计学意义；miRNA-221和阴性对照组比较,p=0<0.01,差异有统计学意义；miRNA-222和阴性对照组比较,p=0<0.01,差异有统计学意义；miRNA-92b和阴性对照组比较,p=0<0.01,差异有统计学意义。(4) RT-PCR结果：实验组(分别转染miRNA-221、miRNA-222、miRNA-92b抑制剂),阴性对照组(转染类似于miRNA抑制剂的siRNA),实验各组p57kip2mRNA的表达量均比阴性对照组高。空白对照组和阴性对照组比较：p=0.565>0.05,差异无统计学意义；miRNA-221与阴性对照组比较,p=0.044<0.05,差异有统计学意义；miRNA-222与阴性对照组比较,p=0.042<0.05,差异有统计学意义；miRNA-92b与阴性对照组比较,p=0.012<0.05,差异有统计学意义。[结论](1) miRNA-221、miRNA-222、miRNA-92b三种miRNA在HepG2细胞和QSG-7701细胞中都有表达。(2)在肝癌中p57kip2应是miRNA-221、miRNA-222、miRNA-92b的靶基因,三种miRNA均负调控p57kip2mRNA表达,促进细胞增殖,提示与肝癌的发生密切相关。