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研究背景:肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。非小细胞肺癌（Non-small-cell lung carcinoma,NSCLC）包括鳞状细胞癌（鳞癌）、腺癌和大细胞癌,约占所有肺癌的80%。大多数病人诊断明确时已经是晚期,不适于进行手术根治,而传统放化疗等临床治疗手段存在耐药反应、毒性反应和有效性局限等问题,这给临床治疗方案的选择带来极大的困难,因此开发新的治疗手段和方法十分迫切和必要。免疫检查点是指通过平衡共刺激和共抑制信号来控制T细胞免疫应答强度的信号通路。T细胞是机体免疫系统抗肿瘤免疫应答的核心,无论是细胞免疫疗法还是基因免疫疗法,最终目的都是激活自身T细胞免疫应答。最近多个临床实验的结果证明,免疫疗法对于不同肿瘤类型均显示出非常显著的疗效,又以黑色素瘤、非小细胞肺癌、霍奇金淋巴瘤、肾癌和前列腺癌等疗效最为明显。免疫疗法治疗后仍可以保持较长时间的肿瘤抑制活性,对于已经发生肿瘤转移的患者仍有疗效。临床使用PD1/PD-L1单克隆抗体和CTLA-4抗体可显著改善转移性NSCLC患者的中位无进展生存期（Progress free survival,PFS）和生活质量评分（Quality of Life,QoL）。B7家族同源蛋白5（B7-H5）是一种新近被发现的B7家族同源蛋白,B7-H5蛋白的表达在人的多种器官和组织能够被检测到,在造血谱系细胞上的表达量最高。随着高通量测序技术的成熟,越来越多的研究采用芯片对研究样本进行分析,获得了海量的包括肺癌的相关基因表达资料在内的生物信息学数据,这将是我们后续数据库分析的资料来源。作为世界上最大的癌基因芯片数据库和整合数据挖掘平台,Oncomine数据库的主要价值在于探索肿瘤上基因表达改变。基于Oncomine数据库我们可以更加清晰的汇总分析关于肺癌的基因表达情况的各独立研究的结果,并最终得出B7-H5在肺癌上表达的荟萃分析结论。虽然在细胞系和小鼠模型上已经有多个研究探索了 B7-H5的分子通路和免疫学功能,但是目前对于它在肺癌特别是NSCLC中表达的研究仍非常零散,其表达情况与预后的关系仍然是未知的。研究目的:本研究以东部战区总医院2012-2014年间收集到的106例确诊为NSCLC患者的肺癌石蜡组织切片为研究对象,综合对患者的多年随访记录,拟探讨B7-H5在NSCLC上的表达情况以及其与患者预后的相关性,为新的NSCLC免疫检查点治疗靶标开发和提出新的患者预后判断指标提供有效的数据支撑。研究方法:1.数据库挖掘:基于Oncomine数据库,分析B7-H5分子在多种肿瘤特别是肺部肿瘤上的表达情况。2.免疫组化研究:通过对收集到的病例石蜡组织包埋样本进行B7-H5分子和CD8分子的免疫组织化学染色,研究B7-H5和CD8分子在NSCLC上的表达情况。3.数据分析:统计免疫组化样本的阳性细胞数和阳性细胞比例值,计算得出免疫反应性评分。再利用SPSS v.22软件的两独立样本的非参数检验方式分别检查B7-H5分子和CD8分子表达与临床病理特征之间的相关性,分别绘制Kaplan-Meier曲线研究与生存的相关性。将所有病例按照B7-H5与CD8表达的高低不同分成四组,比对四组生存之间的差异。最后利用COX回归分析本研究中预后的相关性因素。研究结果:1、在收集并入组的85例肺癌组织样本中,B7-H5分子的阳性样本数为26,阳性率为30.3%。2、分析B7-H5表达水平与临床病理学特征之间的关系,发现其在不同年龄分组之间表达存在差异（p=0.023）,而与性别、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移和肿瘤组织学类型之间未观察到显著性相关。分析CD8表达与临床病理学特征之间的关系,发现其在不同肿瘤大小之间存在显著差异（p=0.019）,并且与临床分期相关（Ⅰ vs Ⅲ,p=0.044）,而与性别（p=0.551）、年龄（p=0.726）、淋巴结转移（p=0.863）和肿瘤组织学类型（p=0.519）分组之间未观察到显著性相关。3、在对B7-H5和CD8联合分析中,我们发现B7-H5的表达和CD8+肿瘤浸润淋巴细胞数量之间存在显著性相关（p=0.044）。随后将所有病例分成B7-H5highCD8high（BHCH）、B7-H5lowCD81ow（BLCL）、B7-H5highCD81ow（BHCL）和B7-H5lowCD8high（BLCH）四组,发现BHCL组的预后明显差于其他组（p=0.046）。提示我们两者的联合分析可以作为NSCLC预后的有价值的预测指标。4、对各临床病理参数、B7-H5以及CD8表达水平的单因素和多因素的COX回归分析。多元回归分析显示,淋巴结转移和临床分期均对预后有显著影响（p=0.041,p=0.031）。结论:本研究检测发现了 B7-H5分子在NSCLC上呈现低染色阳性（阳性表达率约30%）,并且肿瘤细胞表达较高水平的B7-H5与较低的CD8+肿瘤浸润淋巴细胞水平预示着较低的无进展生存（PFS）和较差的预后。