c-kit,sca-1,nanog阳性细胞在大鼠心包组织中的表达分布

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背景心肌组织含有多种干细胞,对心肌的再生育修复起重要的积极意义。心包在发生上与心肌来源相似,作为心脏的外围器官,理论上应存在相似的细胞成分。但是,心包是否也存在心肌干细胞的亚群,目前尚不清楚。目的研究心包中c-kit、sca-1、nanog阳性细胞的存在与分布,以及各细胞亚群之间的共表达关系。为干细胞分群提供依据,为采用干细胞疗法治疗心肌梗死提供理论依据和新的思路。方法1.麻醉大鼠后颈椎脱臼处死,取下完整的心包。利用冰冻切片和石蜡切片技术切片。HE和Masson染色。2.利用免疫组化染色技术鉴定心包中c-kit阳性细胞、sca-1阳性细胞、nanog阳性细胞的存在及分布。3.利用免疫荧光显色技术证明心包中c-kit阳性细胞、sca-1阳性细胞、nanog阳性细胞的存在及其它们相互之间的表达关系。4.利用蛋白印迹法观察心包中c-kit、nanog、sca-1蛋白的表达,并对其进行半定量分析。结果1.组织学证明,心包的主要构成是纤维结缔组织,其中含有部分小而圆的细胞。免疫组织化学显示心包中存在c-kit阳性细胞、sca-1阳性细胞、nanog阳性细胞。2.c-kit阳性细胞与sca-1阳性细胞存在共表达,sca-1阳性细胞和nanog细胞存在共表达,c-kit阳性细胞和nanog阳性细胞存在共表达。3.c-kit蛋白,nanog蛋白,sca-1蛋白的相对表达量分别为0.88±0.08,0.68±0.05,0.87±0.09。结论心包中存在c-kit、sca-1、nanog三个阳性细胞亚群,他们之间存在交叉表达,这些细胞与心肌干细胞亚群相同,它们可能对心肌再生起一定的作用。
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