论文部分内容阅读
研究目的：本研究旨在通过观测经补肾活血汤灌服的去势大鼠腰椎间盘的组织形态学及IL-1、髓核脊索细胞含量变化及表达的影响,评价补肾活血汤的实验疗效,探索补肾活血汤防治腰椎间盘退变的部分分子生物学机制,并为延缓或阻止腰椎间盘自然退变提供客观评价指标,同时与生理盐水相比较,证实补肾活血汤对腰椎间盘退变的防治作用。研究方法：采用8月龄健康雌性SD大鼠100只,体重350—400g,由湖南省中医药研究院实验动物中心提供并饲养。100只大鼠按照随机数字分为三组,A空白组20只,B假手术组20只,C手术组60只。其中C手术组60只,又随机分为C1去势组,C2去势灌药组,C3阳性药物对照组,各20只。手术组按照摘卵巢手术制造去势大鼠模型,假手术组在其双侧卵巢旁边分别取和卵巢同等大小的脂肪组织。造模后一周开始灌服药物,实验组予以补肾活血汤灌胃,阳性对照组予以戊酸雌二醇片灌胃,模型组、假手术组及空白对照组予以等容量生理盐水灌胃,每天一次。于灌药6周后和12周后每组各处死10只大鼠取出大鼠腰椎部分,剔除椎体周围软组织,经L5/6椎间隙取出椎间盘局部组织,免疫组化方法观察其腰椎间盘组织形态学变化及腰椎间盘中髓核脊索细胞数量及白介素-1的阳性表达的变化,并相互进行比较。研究结果：1、病理学结果：显示在整个治疗过程中,空白组、假手术组脊索细胞逐渐减少,没有统计学意义(P>0.05),治疗第6、12周后模型组髓核细胞分布不均匀,脊索细胞明显减少,与空白组、假手术组相比较,脊索细胞数量明显减少,且随时间延长差异有显著性(P<0.05),补肾活血汤组与戊酸雌二醇组与治疗6、12周后脊索细胞数量少于模型组,差异有显著性(P<0.05),中药组与阳性药物组在治疗6、12周后脊索细胞无显著性差异(P>0.05)。2、免疫组化结果：治疗6周后空白组、假手术组椎间盘组织中IL-1几乎无阳性表达,模型组可见较强染色反应,补肾活血汤组与戊酸雌二醇组有染色反应,蛋白表达比较模型组较空白组、假手术组、都有显著增高(P<0.05),补肾活血汤组与戊酸雌二醇组组间无显著性差异(P>0.05),补肾活血汤组、戊酸雌二醇组与空白组比较有显著差异性(P<0.05)。研究结论：1、去势可加速腰椎问盘退变；2、补肾活血汤和雌激素对去势大鼠腰椎间盘退变有明显延缓作用,且能通过降低血浆及椎间盘局部组织内的IL-1等炎性因子的含量及椎间盘髓核脊索细胞数量调控来促进骨细胞生成,延缓椎间盘退变。