槐耳清膏联合环磷酰胺节拍化疗抑制裸鼠乳腺癌新生血管生成的实验研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:jack88698
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目的:观察槐耳清膏联合环磷酰胺节拍化疗对乳腺癌裸鼠移植瘤的抑瘤效应、毒副反应及对肿瘤血管生成的影响,探索槐耳清膏联合节拍化疗抗肿瘤新生血管治疗的可行性。方法:1、建立动物模型:分别在20只雌性裸鼠右侧胸壁乳垫下接种MCF-7人乳腺癌细胞株,0.2ml/只,6×10~7个/ml。2、分组及用药:接种后隔日测量移植瘤瘤体积,达到150~200mm3时将20只荷瘤裸鼠随机分成4组,每组5只,A组(CTX-LDM组)CTX20mg/kg qd ip;B组(CTX-MTD)CTX150mg/kg,qod ip (共3次);C组(槐耳+CTX-LDM组)槐耳清膏200mg/d CTX20mg/kg qd ip;D组(NS组)生理盐水等体积,qd ip。治疗21天为一周期。3、用药期间对裸鼠的一般状况进行观察,隔日测量并记录裸鼠体重及移植瘤的体积,每周尾静脉采血计数外周血白细胞数。4、组织病理检查:治疗结束后用颈椎脱臼法处死裸鼠,无菌条件下完整剥离肿瘤组织,测量瘤重,计算抑瘤率;免疫组织化学SP法检测各组瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)、血小板反应蛋白-1(TSP-1)的表达水平。结果:1、抑制肿瘤生长:用药第7天,槐耳联合LDM组的瘤体积增长最慢,明显低于LDM组、NS对照组,差异有统计学意义(PAC=0.04,PCD<0.001);MTD组瘤体积增长慢于NS组,差异有统计学意义(PBD=0.006),而LDM组与NS组相比,瘤体积的增长无统计学意义;用药第14天,各治疗组瘤体积生长均小于NS组,差异有统计学意义(P<0.05),槐耳联合LDM组肿瘤生长均慢于LDM组(PAC=0.01)、MTD组(PBC=0.024);用药第21天,各治疗组瘤体积与NS组比较均有统计学意义(P<0.05),槐耳联合LDM组瘤生长明显慢于LDM组和MTD组,瘤体积差异具有统计学意义(PAC=0.034,PBC=0.023),而LDM组移植瘤生长慢于MTD组,差异仍无统计学意义(PAB=0.846)。槐耳联合LDM组瘤重明显低于其他各组,与LDM组、MTD组相比差异有统计学意义(P<0.05);各治疗组与NS对照组比较均有统计学意义(P<0.05);LDM组与MTD组相比差异无统计学意义。各治疗组抑瘤率分别为LDM组36.69%,MTD33.60%,联合组62.60%。2、毒副反应:体重测定:用药第7天,环磷酰胺MTD组裸鼠精神萎靡,进食渐减少,体重下降;用药第13天,体重下降至最低,差异有统计学意义(PAB=0.07,PBC=0.031,PBD=0.012);用药第21天,各治疗组裸鼠体重与NS组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。白细胞测定:治疗结束,各治疗组白细胞数与NS组相比差异无统计学意义(P>0.05),各治疗组之间白细胞数比较均无统计学意义(P>0.05)。3、免疫组化结果:NS对照组MVD、VEGF阳性表达最高,槐耳联合LDM组阳性表达最低,LDM组低于MTD组。统计学分析示槐耳联合LDM组瘤组织中MVD、VEGF计数低于MTD组、NS组,差异有统计学意义(P<0.05),与LDM组相比差异无统计学意义(PAC=1.131),LDM组的MVD、VEGF计数低于MTD组、NS组,差异有统计学意义(P<0.05),而MTD组与NS组相比差异无统计学意义(P>0.05)。槐耳联合LDM组TSP-1阳性表达评分最高,LDM组阳性评分高于MTD组,槐耳联合LDM组与LDM组相比,差异无统计学意义(PAC=0.087),但与MTD组、NS组相比,差异有统计学意义(P<0.05);NS组评分最低,与LDM组相比差异有统计学意义(P<0.05),与MTD组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:槐耳清膏联合环磷酰胺节拍化疗可以通过上调TSP-1的表达,下调VEGF的表达发挥抗肿瘤血管生成作用,对MCF-7乳腺癌产生抗肿瘤效应,并可减轻最大耐受剂量化疗的毒副作用。
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