佐剂是一种用于疫苗中,提高机体对抗原的的免疫应答,也可以改变免疫应答类型的物质。自20世纪初佐剂被发现以来,佐剂被广泛应用于改善以及增强疫苗对机体的免疫应答。比如铝佐剂。但铝佐剂不适于重组蛋白和亚单位疫苗,也会产生不良反应,如炎症,刺激局部产生红斑,肉芽肿,皮下结节,接触性皮炎,IgE介导的超敏反应,铝佐剂也不能诱导细胞毒性T细胞应答。目前,尽管已经有大量新型疫苗佐剂处于研究开发和临床试验阶段,但是真正获得批准用于人类疫苗的佐剂屈指可数。因此研发新型的疫苗佐剂在疫苗的研发中具有重要的作用。本次实验旨在探索壬二酸(anchoecacid)和 S-2-羟基戊二酸((2S)-Hydroxyglutaricacid Disodium Salt)分别作为佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗(live hepatitis A virus attenuated live vaccine,HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价它们的佐剂效应。壬二酸是一种具有多种活性的复合分子,具有抗炎、抗感染和抗菌作用。除此之外,壬二酸不仅在治疗痤疮、黑色素瘤还在治疗黄褐斑、酒糟鼻、色素过度沉着及硬化症等方面都有广泛应用。已有临床研究证实壬二酸长期应用于人体安全性高、副作用小、病人的耐受性较好,不会出现细菌耐药性,因此推测其具备潜在的疫苗佐剂效应。S-2-羟基戊二酸为一种钠盐,易溶于水,与酸反应生成2-羟基戊二酸,二者结构类似。研究报道2-羟基戊二酸与肿瘤疾病的发生相关。在实验设计过程中参考了砒霜在医学上的应用,探究S-2-羟基戊二酸是否具有佐剂效应。实验中将甲型肝炎减毒活疫苗HepA-1(18 EU)与4种不同剂量的壬二酸以及4种不同剂量S-2-羟基戊二酸分别混合作为佐剂组、实验组,同时设空白对照组、单纯抗原组、铝佐剂组。实验小鼠经背部皮下多点注射,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血。采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体水平。在整个实验期间,对小鼠的健康状况以及饮食等进行观察,并于实验结束时,取阴性对照组及实验组小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等主要器官制作病理切片进行病理学分析。实验结果表明,壬二酸和S-2-羟基戊二酸都具有佐剂效应。在本次的实验中,S-2-羟基戊二酸的佐剂效应甚至优于铝佐剂。在壬二酸和S-2-羟基戊二酸安全性试验中,实验期间各组小鼠未出现蜷缩、竖毛、搔鼻、抽搐、体重下降、死亡等情况。壬二酸的最佳剂量组和阴性对照组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织病理分析均未观察到明显病理学改变。S-2-羟基戊二酸的最佳剂量组和阴性对照组小鼠的各主要组织器官进行病理分析,均未观察到明显的病理学改变。表明壬二酸和S-2-羟基戊二酸安全性良好。