论文部分内容阅读
本研究旨在探讨丁酸梭菌对肉鸡脂肪代谢的影响及其作用机理。分体内试验和体外试验两部分进行研究。第一部分通过体内试验研究丁酸梭菌和屎肠球菌配伍对肉鸡生产性能、脂肪代谢和盲肠微生物的影响。试验选用1日龄健康罗斯308肉公鸡264只,随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复11只鸡。处理1组饲喂基础日粮,其余3组分别在基础日粮的基础上添加丁酸梭菌1×109CFU/kg,屎肠球菌2×109CFU/kg,丁酸梭菌1×109CFU/kg+屎肠球菌2×10-CFU/kg。试验期为42d。结果发现,日粮中添加丁酸梭菌和屎肠球菌对肉鸡的生产性能、脂肪代谢和盲肠微生物均不存在互作效应,但日粮中添加屎肠球菌显著降低了21d肉鸡血清瘦素水平(P=0.022),提高了42d肉鸡肝脏中的脂肪酸合成酶(FAS)、苹果酸酶(ME)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)mRNA水平(P<0.001);日粮中添加丁酸梭菌显著提升了肉鸡的平均日采食量和日增重(P<0.05),提高了21d肉鸡的血清胰岛素水平(P=0.016)和42d肉鸡的肌内脂肪含量、肝脏FAS和胸肌脂蛋白酯酶(LPL)活性以及肝脏中FAS、ME、ACC和胸肌LPL mRNA表达(P<0.05),降低了21d肉鸡盲肠中拟杆菌门的数量(P=0.030)。以上结果表明,丁酸梭菌组肉鸡肌内脂肪含量的增加与肉鸡脂肪合成能力的增强密切相关。第二部分通过体外试验研究丁酸梭菌及其组份对脂肪代谢的影响。试验首先通过丁酸梭菌1×106、1×107和1×108CFU/m1分别与Caco-2细胞共培养2h,研究了丁酸梭菌对Caco-2细胞的细胞毒性和血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)mRNA表达的影响。结果发现,丁酸梭菌在此添加剂量范围内对Caco-2细胞成活率无影响,但丁酸梭菌1×107CFU/ml显著提高了Caco-2细胞的ANGPTL4mRNA表达。之后就丁酸梭菌1×107CFU/ml的各组份对Caco-2细胞ANGPTL4的影响进行了探究,结果发现,丁酸梭菌的细胞壁成分和其代谢产物均可以促进Caco-2细胞的ANGPTL4mRNA表达和蛋白分泌。为了确定是否是丁酸梭菌的主要代谢产物丁酸起到了促进Caco-2细胞ANGPTL4产生的作用,试验就单羧酸转运蛋白1(MCT1)在丁酸梭菌代谢产物影响Caco-2细胞ANGPTL4中的作用和0.1mM丁酸对Caco-2细胞ANGPTL4的影响进行了研究。最终确定了促进Caco-2细胞ANGPTL4产生的丁酸梭菌的代谢产物的主要成分就是丁酸。此外,试验中还发现,活的丁酸梭菌、灭活的丁酸梭菌以及丁酸分别作用于Caco-2细胞2h后所产生的可溶性成分均具有降低HepG2细胞脂肪合成代谢相关基因表达的作用。以上结果表明,丁酸梭菌1×107CFU/ml可以通过其细菌壁成分和其主要的代谢产物如丁酸来降低脂肪生成。综上所述,丁酸梭菌本身具有的功能是降低脂肪沉积,其发挥作用的有效成分是其细菌壁成分和其主要的代谢产物丁酸。而丁酸梭菌提高肉鸡肌内脂肪沉积的现象可能与丁酸梭菌改变了肉鸡肠道中的菌群结构进而促进了肉鸡的脂肪合成有关。