论文部分内容阅读
目的1.探讨明胶底物膜法测试精子顶体酶活性的实验室质量控制。2.探讨精子顶体形态和精子顶体酶之间的关系,了解不同顶体畸形精子与顶体酶活性的相关性,以及与体外受精(in vitro fertilization ,IVF)受精率的关系。3.透射电镜检查了解精子形态和功能之间的联系。4.通过对精子形态和功能检查,选择合适的受孕方式。方法根据世界卫生组织(WHO)标准,标本的采集是在禁欲3-7天后,在本中心取精室通过手淫的方法,取精液于塑料容器中,采集后立即在37℃水域箱中静止液化,进行精液常规检查,达到IVF助孕标准的精液纳入标本选择范围,根据形态学检查,分为两组(IVF和half-ICSI(half intracytoplasmic sperm injection)组)比较。液化后的精子通过上游法处理,以备行精子改良巴氏染色检查、明胶法测试顶体酶活性。透射电镜检查对11例精液标本分析。结果1.明胶的铺片温度,合适的精子密度以及胶片的存储使明胶底物膜法测定顶体酶活性的稳定性,可靠性提高。2.上游法处理后的精子能够达到98.7%的成活率,为精子形态和功能的检查奠定了活细胞的基础。3.精子正常形态率<5%的患者行IVF助孕时较精子正常形态≥5%的患者受精率降低,P<0.05,有统计学差异。4.精子顶体形状不规则或含有多个小空泡受精率明显降低。顶体中含有多个小空泡顶体酶活性明显下降。5.精子形态学检查中,顶体形态不规则的比例在正常受精和受精障碍的比较中有明显统计学意义(P<0.05)6.透射电镜对光镜下不同畸形精子的结构和功能分析。结论1.上游法筛选后的精子行精子功能检测,更能反应精子的受精情况。2.通过质控,明胶法测试精子顶体酶活性能够成为一个稳定的,较为可靠的测定精子功能的方法。3.光学显微镜下顶体内空泡是透射电镜下核内空泡的影像,密集核内空泡反应精子的成熟程度。4.通过精液常规检查(rortine semen analysis RSA),巴氏染色分析形态,顶体酶活性测定,能够对部分异常精液进行体外受精能力的预测。