论文部分内容阅读
目的：本研究采用流式细胞术检测冠心病不稳定型心绞痛(UA)患者外周血血小板微粒(PMP)膜表面功能蛋白CD62p、PAC-1、CD42b及CD40L的表达水平,比较上述指标在冠心病UA不同严重程度患者中的差异；并采用显微成像流式细胞术观察UA患者外周血PMP与白细胞微粒(LMP)、内皮细胞微粒(EMP)、红细胞微粒(RMP)间形成的结合体形态,并检测结合体在冠心病UA患者中的表达情况。同时,研究PMP表面膜功能蛋白及PMP-LMP结合体、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体在冠心病UA血瘀证及非血瘀证中的差异,为冠心病血瘀证的形成提供理论基础。方法：选取2015年8月至2015年12月于中国中医科学院广安门医院心内科住院治疗的冠心病不稳定性心绞痛患者110名,采用同期广安门医院南区体检中心正常志愿者20名作为对照组。将冠心病患者分为血瘀证组和非血瘀证组,并按braunwald分级分为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级。于清晨对所有受试者空腹抽取静脉血,并由柠檬酸钠抗凝。运用梯度离心的方法制备无血小板血浆(platelet-free plasma, PFP),将PFP存于-80℃冰箱内,在2周内利用普通流式细胞仪及显微成像流式细胞仪完成检测。将检测PMP及其表面膜功能蛋白CD62p、PAC-1、CD42b、CD40L的表达,以及PMP-LMP结合体、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体水平并观察其形态,分析上述指标与冠心病不稳定心绞痛严重程度的关系以及冠心病血瘀证的相关性。结果：冠心病UA患者外周血PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表达水平高于健康人,差异有统计学意义(p<0.05)；而冠心病UA患者PMP表面CD42b表达水平与健康人相比差异无统计学意义(p>0.05)；冠心病UA血瘀证患者PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表达水平明显高于非血瘀证组(p<0.05),并与血瘀证存在相关性(p<0.05)。UAⅢ级患者外周血PMP水平高于UAⅠ级、Ⅱ级患者,差异有统计学意义,UAⅡ级和Ⅲ级患者PMP表面PAC-1、CD40L表达水平均高于UAⅠ级患者(p<0.05),UAⅢ级患者PMP表面CD62p表达水平高于UAⅠ级、Ⅱ级患者(p<0.05)。有序多分类Logistic回归分析显示PMP及其表面CD62p、PAC-1、CD40L表达水平与不稳定心绞痛严重程度密切相关。冠心病UA患者外周血PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-LMP结合体、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体水平高于健康人(p<0.01)；UAⅢ级患者PMP、RMP水平高于UA Ⅰ级、Ⅱ级患者,差异有统计学意义(p<0.01),Ⅱ级、Ⅲ级患者LMP、EMP、PMP-EMP结合体水平高于Ⅰ级患者,差异有统计学意义(p<0.05)；冠心病UA血瘀证患者PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体水平高于非血瘀证患者(p<0.05),且与血瘀证存在相关性(p<0.01)。结论：1、冠心病UA患者外周血PMP及PMP表面CD62p、PAC-1、CD40L表达水平较健康人升高,且CD62p、PAC-1、CD40L表达水平与UA严重程度相关,表明PMP的黏附、聚集、促炎症反应作用参与了UA的发生发展。2、冠心病UA血瘀证患者PMP及PMP表面CD62p、PAC-1、CD40L表达水平较非血瘀证患者升高,且与血瘀证呈正相关,提示PMP的黏附、聚集、促炎症反应作用与血瘀证的形成有关。3、冠心病UA患者外周血PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-LMP结合体、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体水平高于健康人,且PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP结合体水平与UA严重程度相关。4、冠心病UA血瘀证患者PMP、LMP、EMP、RMP、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体表达水平较非血瘀证患者升高,且与血瘀证呈正相关,提示PMP、LMP、EMP、 RMP、PMP-EMP结合体、PMP-RMP结合体参与了冠心病UA血瘀证的形成。