【摘 要】
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本研究依据卵母细胞胞质均质程度及颗粒细胞层数的多少,将未成熟的卵丘卵母细胞复合体分为四类:第Ⅰ类,胞质中清晰可见凝胶样黑斑且颗粒细胞层数较多;第Ⅱ类,胞质均匀,颗粒细胞层数
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本研究依据卵母细胞胞质均质程度及颗粒细胞层数的多少,将未成熟的卵丘卵母细胞复合体分为四类:第Ⅰ类,胞质中清晰可见凝胶样黑斑且颗粒细胞层数较多;第Ⅱ类,胞质均匀,颗粒细胞层数较多;第Ⅲ类,胞质中清晰可见凝胶样黑斑且颗粒细胞层数较少;第Ⅳ类,胞质均匀,颗粒细胞层数较少。通过地衣红染色核型分析技术观察了四类卵丘-卵母细胞复合体中的卵母细胞核成熟情况,通过体外受精技术对四类卵丘-卵母细胞复合体的发育能力进行评价。本研究还利用细胞凋亡TUNEL染色技术结合激光共聚焦扫描系统研究了四类卵丘-卵母细胞复合体中卵母细胞的凋亡情况与其发育能力的相关性。研究结果如下:1、四类卵丘-卵母细胞复合体成熟22小时后MⅡ期比率分别为71.30%、39.00%、78.10%和64.82%;卵裂率分别为72.64%、47.88%、87.30%和79.25%;8细胞发育率分别为57.18%、19.91%、68.48%和49.87%;囊胚发育率分别为32.30%、10.80%、47.56%和31.36%;囊胚孵化率分别为9.10%、2.27%、26.71%和8.90%。其中,第Ⅱ类卵丘-卵母细胞复合体的MⅡ期比率、卵裂率、8细胞发育率、囊胚发育率、囊胚孵化率都为最低,除囊胚孵化率外,都极显著低于其它三类(P<0.01)。第Ⅲ类卵丘-卵母细胞复合体的MⅡ期比率、卵裂率、8细胞发育率、囊胚发育率、囊胚孵化率都为最高,尤其是在孵化囊胚率极显著高于其它三类(P<0.01)。研究表明,牛卵丘-卵母细胞复合体的形态与其发育能力相关。2,应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP末端缺口标记法(TUNEL)对未成熟、成熟22小时、成熟72小时的四类卵母细胞进行了凋亡率的检测,结果表明,未成熟的四类卵母细胞及成熟22小时的四类卵母细胞中都没有发现凋亡的卵母细胞,但在成熟72小时的四类卵母细胞中都有大量的凋亡发生。研究表明,未成熟和成熟22小时卵母细胞的发育能力与卵母细胞的凋亡不相关,随着成熟培养时间的延长,卵母细胞的凋亡率会增加。
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