2型糖尿病中医证型与肠道菌群结构及其代谢产物的相关性研究

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目的:通过2型糖尿病(T2D)患者与健康人的肠道菌群的代谢产物短链脂肪酸的含量以及肠道菌群的多样性及相似性的研究,证实肠道菌群结构及其代谢产物在T2D不同中医证型间存在显著差异,为阐明T2D不同中医证候的物质基础和病理机制提供理论和实验依据,同时为相关慢性代谢性疾病提供研究参考。  方法:以随机抽取并符合纳入标准的T2D患者与健康志愿者为研究对象,分为气阴两虚证组、阴阳两虚证组、阴虚热盛证组、湿热困脾证组、血瘀脉络证组、未分型组和健康对照组,采集粪便标本并分成两份,一份用气相色谱法检测样本中短链脂肪酸的乙酸、丙酸和丁酸的含量;一份提取DNA并经过PCR扩增后,采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)进行DNA指纹图谱分析肠道菌群结构的多样性和相似性;基于两个实验的结果,研究分析五组T2D不同中医证型患者与健康人群组间的肠道菌群结构及其代谢产物的差异性和相关性。  结果:气相色谱检测短链脂肪酸分析结果表明:T2D患者与健康人组肠道菌群代谢产生的短链脂肪酸(SCFA)有显著性的差异。气阴两虚证组、阴阳两虚证组、阴虚热盛证组、湿热困脾证组和血瘀脉络组分别与健康对照组的乙酸含量差异有统计学意义(P<0.05),未分型组与健康对照组的乙酸含量差异无统计学意义;湿热困脾组与健康对照组的丙酸含量差异有统计学意义(P<0.05),气阴两虚证组、阴阳两虚证组、阴虚热盛证组、血瘀脉络组和未分型组分别与健康对照组的丙酸含量差异均无统计学意义;气阴两虚证组、阴阳两虚证组、阴虚热盛证组和湿热困脾证组分别与健康对照组的丁酸含量差异均有统计学意义(P<0.05),血瘀脉络证组和未分型组与健康对照组的丁酸含量差异均无统计学意义。  DGGE检测肠道菌群DNA指纹图谱分析结果表明:T2D分型患者与健康人肠道菌群多样性有显著性的差异。五个证型组与健康对照组的肠道菌群结构的组间差异具有统计学意义(P<0.05);T2D五个证型组中气阴两虚证组分别与阴虚热盛证组、湿热困脾证组的肠道菌群结构的组间差异具有统计学意义(P<0.05),阴阳两虚证组分别与阴虚热盛证组、湿热困脾证组的肠道菌群结构的组间差异具有统计学意义(P<0.05),血瘀脉络证组与其他证型组的肠道菌群结构的组间差异具有极显著的统计学意义(P<0.01),此外其他组间差异皆无统计学意义。  气相色谱法对肠道菌群代谢产物的检测结果和DGGE法对肠道菌群结构的多样性和相似性的分析结果,反映出的T2D五个中医证型组及健康对照组患者的肠道菌群结构差异性和相似性结果基本一致。  结论:  (1)T2D五个中医证型患者与健康人比较,肠道菌群代谢产物短链脂肪酸中乙酸、丁酸在粪便中的含量均存在差异;五个证型之间比较,乙酸的含量均存在差异。  (2)T2D五个中医证型组患者与健康人比较,肠道菌群结构的多样性和相似性均存在差异;五个证型之间比较,肠道菌群结构的多样性和相似性存在差异。  (3)T2D五个中医证型与健康人比较以及T2D五个证型之间,肠道菌群结构的差异性可能存在于某种特征细菌种属的构成比。
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