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目的：采用血清药理实验方法,研究荆芥、桂枝挥发油含药血清体外对甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)增殖的影响,并探讨其抗病毒效应的TLR/IFN信号机制,为解表药“辛散解表”性效与应用提供科学实验依据。方法：(1)含药血清体外抗甲型流感病毒作用研究：①细胞病变法(CPE)检测荆芥、桂枝挥发油含药血清对狗肾传代细胞(MDCK)的最大无毒浓度(TCo)。②血凝实验测定甲型流感病毒对MDCK细胞的感染性。③制备不同取血时间点的荆芥、桂枝挥发油含药血清,通过CPE法和血凝实验对不同取血时间点的含药血清进行药效学比较,筛选获得制备含药血清的最佳取血时间点。④血凝实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察荆芥、桂枝挥发油含药血清对甲型流感病毒细胞内增殖的抑制作用及对甲型流感病毒的直接杀灭作用,同时探讨含药血清对病毒增殖影响的最佳给药时间。(2)含药血清抗甲型流感病毒作用机制研究：①ELISA法测定流感病毒感染细胞IFN-β的分泌水平。②采用RT-PCR法测定荆芥、桂枝挥发油含药血清对流感病毒感染细胞TLR7、IFN-β、TRAF6、MyD88mRNA表达量的影响。③Western Blot法观察含药血清对流感病毒感染细胞TRAF6蛋白表达水平的影响。结果：①荆芥、桂枝挥发油含药血清对MDCK细胞的TC0均为5%,即在相应培养基中含药血清含量为5%。②甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)对MDCK细胞的病毒半数组织感染量(TCID50)为10-3.5/0.1ml。③对不同取血时间点制备的含药血清进行药效学比较,确定制备荆芥、桂枝挥发油含药血清的时间点为连续灌胃给药5d(每日1次),末次给药后1h进行。④荆芥、桂枝挥发油含药血清5%、3.5%、2.5%浓度对10TCID50甲型流感病毒的增殖均有显著抑制作用,且5%、3.5%浓度的荆芥、桂枝挥发油含药血清对甲型流感病毒具有直接杀灭作用。⑤与病毒对照组比较,荆芥、桂枝挥发油含药血清在5%浓度时显著升高流感病毒感染MDCK细胞上清液中IFN-β含量(P<0.01或P<0.05),并显著提高流感病毒感染MDCK细胞TLR7、IFN-β mRNA表达量(P<0.01),显著抑制TRAF6、MyD88mRNA表达水平(P<0.01),能明显减少TRAF6蛋白表达量(P<0.01)。结论：荆芥、桂枝挥发油含药血清对甲型流感病毒在MDCK细胞中的增殖具有明显抑制作用,并具有一定直接杀灭作用,结果与两种挥发油的体外、体内实验结果—致,进一步明确证实了两者的抗流感病毒效应。其抗甲型流感病毒机制可能与激活TLR7通路,提高IFN-β的分泌量,促进流感病毒感染细胞IFN-β、TLR7mRNA表达、抑制TRAF6、MyD88mRNA表达相关。