内吗啡肽对棕榈酸条件下人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制的研究

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目的:1、探讨内吗啡肽(EMs)对棕榈酸(PA)培养条件下人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)合成血管活性物质的影响;2、探讨EMs对PA培养条件下HUVECs的作用机制。方法:将取自新生儿脐带并经鉴定的HUVECs,随机分为:正常对照组、PA组、EM1干预组和EM2干预组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析EM1和EM2对PA培养条件下HUVECs活力的影响;运用硝酸还原酶法测定各组细胞一氧化氮(NO)的含量,吸收光谱法检测一氧化氮合酶(NOS)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中内皮素(ET-1)的含量;实时荧光定量(RT-PCR)检测eNOSmRNA(内皮型一氧化氮合酶mRNA)、ET-1mRNA的表达;检测加入纳络酮后,EMs对HUVECs合成NO水平的影响。结果:与正常对照组相比,PA组HUVECs活力下降,iNOS与ET-1分泌增加,NO、NOS含量降低;同时eNOSmRNA的表达降低明显,而ET-1mRNA基因表达增加(P<0.05)。EMs各浓度组可使以上结果逆转(P<0.05)。加入纳络酮后观察,与EMs组比较,NO水平下降明显(P<0.05)。结论:EMs对PA导致的HUVECs功能受损有保护作用,这种作用可能是通过激动μ阿片受体发挥的。
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