论文部分内容阅读
分子印迹技术（MIT）是一种分子识别检测技术，具有构效预定性、识别专一性、应用广泛性的突出优势。基于MIT的生物传感器在分析检测方面具有灵敏度高、检出限低、选择性好等优点。本论文将灵敏度高、可控性强的电化学发光技术（ECL）与分子印迹技术有效结合起来，引入酶放大、有机染料放大、量子点表面分子印迹等技术，通过电聚合的方法制备了一系列新型分子印迹电化学发光（MIP-ECL）传感器，并成功应用于农兽药残留的检测。主要内容如下：（1）制备了一种新型的检测农药残留异丙隆（IPU）的MIP-ECL传感器。在检测过程中，IPU与葡萄糖氧化酶（GOD）标记的IPU（GOD-IPU）发生竞争反应。竞争反应发生后，留在分子印迹膜上的GOD-IPU催化底液中的葡萄糖产生H2O2，最后与鲁米诺发生电化学发光响应。随着样品中的IPU不断地竞争取代GOD-IPU，ECL强度不断减低。方法的检出范围为9×10-11mol/L510×10-11mol/L，检出限为3.78×10-12mol/L，应用于稻田水样的检测，回收率为98.5%102.1%。由于引入了酶催化放大效应，传感器表现出了高选择性、高灵敏度的特点。（2）提出了一种基于罗丹明B（RhB）放大发光效应的新型MIP-ECL传感器，并应用于农药残留赤霉素A3（GA3）的检测。竞争反应在GA3和罗丹明B标记的GA3（RhB-GA3）之间发生。竞争后，印迹膜上的RhB在一定的电压下被氧化为氧化态的RhB，并放大鲁米诺微弱的ECL信号。随着竞争反应的进行，印迹膜上的RhB-GA3不断被样品中的GA3取代，体系ECL强度不断减小。方法的检测范围为1×10-11mol/L300×10-11mol/L，检出限为3.45×10-12mol/L。该传感器灵敏度高，选择性好，线性范围宽，将其用于啤酒实际样品的检测，方法回收率为96.0%103.2%。（3）基于表面分子印迹技术和酶放大技术，制备得到一种检测农药残留二氯吡啶酸（CPD）的MIP-ECL传感器。通过自组装技术，将CdTe QDS修饰到金电极表面，然后以邻苯二胺为功能单体，二氯吡啶酸为目标分子电聚合得到分子印迹膜。竞争反应在CPD和辣根过氧化物酶（HRP）标记的CPD（HRP-CPD）之间发生。经过竞争反应后，样品中的CPD取代膜上的HRP-CPD，随着HRP的减少，底液中被HRP催化分解的H2O2减少，CdTe-H2O2体系的ECL强度不断增加，从而达到间接检测农药残留二氯吡啶酸的目的。方法检测范围为3×10-11mol/L3500×10-11mol/L，检出限为1.06×10-11mol/L。该传感器灵敏度高，线性范围宽，响应时间短，可重复使用，已成功应用于实际蔬菜样品中痕量CPD的检测。（4）构建了基于分子印迹发光膜的新型MIP-ECL传感器，用于检测兽药残留强力霉素（DC）。首先以茜素红掺杂邻苯三酚为功能单体，强力霉素为模板分子，用电聚合的方法制备得到分子印迹电化学发光膜修饰电极。邻苯三酚与茜素红在电极上发生一系列化学反应，产生电化学发光信号，而强力霉素能够增强邻苯三酚-茜素红体系的电化学发光强度，从而达到间接测定兽药残留强力霉素的目的。随着重新吸附样品中的DC浓度不断增加，体系的ECL强度不断增强。方法的检测范围为2×10-10mol/L500×10-10mol/L，检出限为5.17×10-11mol/L，该传感器应用于市售的鲤鱼样品中的DC残留检测，结果令人满意。（5）针对手性物质分析测定的难点，引入6-SH-β-CD提高分子印迹传感器的识别能力，研制了新型MIP-ECL传感器用于左旋咪唑（LMS）的检测分析。首先在金电极表面自主装得到6-SH-β-CD修饰电极，然后在该修饰电极上以邻苯二胺为功能单体，LMS为模板分子，制备得到分子印迹膜。检测过程中，LMS与葡萄糖氧化酶（GOD）标记的LMS（GOD-LMS）发生竞争反应。经过竞争反应后，印迹膜上的GOD-LMS不断被样品中的LMS取代，底液中鲁米诺-葡萄糖发光体系的ECL强度不断减小，以此建立了一种检测LMS的新方法。方法的检测范围为8×10-11mol/L4000×10-11mol/L，检测出限为2.12×10-11mol/L。由于6-SH-β-CD能够极大的提高分析印迹膜的识别能力，相对于传统分子印迹传感器，该传感器表现出了有着更好的识别能力。