【摘 要】
：
研究背景和目的:哺乳动物胎肝（fetal liver,FL）造血时期是造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）成熟和快速扩增的时期,由FL基质细胞构成的造血微环境在这一过程中发挥了重要的辅助作用。目前国内外的研究集中于用FL基质细胞在体外诱导其他类型的细胞分化成为HSC,而关于其在体内的造血辅助作用,则有待进一步探索。本课题的研究目的是揭示不同类型FL基质细胞之间的差异
【基金项目】
：
国家重点基础研究发展计划（项目编号:2014CB964703）；
论文部分内容阅读
研究背景和目的:哺乳动物胎肝（fetal liver,FL）造血时期是造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）成熟和快速扩增的时期,由FL基质细胞构成的造血微环境在这一过程中发挥了重要的辅助作用。目前国内外的研究集中于用FL基质细胞在体外诱导其他类型的细胞分化成为HSC,而关于其在体内的造血辅助作用,则有待进一步探索。本课题的研究目的是揭示不同类型FL基质细胞之间的差异,并探究FL基质细胞在体内的造血辅助作用。研究内容和方法:本课题采用体外贴壁培养的方式获得C57BL/6小鼠FL和骨髓（bone marrow,BM）基质细胞,并使用CD29、CD44、CD106、CD45和Sca-1五种表面抗原鉴定培养的基质细胞,同时区分出不同的细胞类型。此后将2.3*10~5个FL基质细胞与1.7*10~4个小鼠BM LK细胞（Lin-c-Kit+细胞,目前比较公认的小鼠造血干/祖细胞）混合后,经骨髓腔内注射移植到经过9.0 Gy 60Coγ射线辐射的受体小鼠体内,同时以单独移植LK组以及LK与小鼠胚胎成纤维细胞（mouse embryonic fibroblast,MEF）共移植组作为对照,通过观测受体的生存状况,检测各项血液指标的变化以及外源血系细胞的嵌合率,评价造血重建效果,进而分析FL基质细胞在体内发挥的造血辅助作用。研究结果和结论:体外培养得到了短梭形和成纤维细胞样两类在FL和BM中均存在的基质细胞,短梭形细胞表面抗原表达为CD106-CD45+CD29+CD44+,成纤维形细胞样细胞为CD106+CD45-CD29+CD44+。体内移植实验结果显示LK与FL基质细胞共移植组受体小鼠两个月内存活率为100%,而单独移植LK以及LK与MEF共移植组均在辐射后一到两周内出现死亡,两个月存活率为80%;各移植组受体各项血液指标均在一个半月到两个月内恢复到正常水平,但LK与FL基质细胞共移植组在移植后的前两周血小板水平都高于其他组,移植后第二周红细胞与血红蛋白水平显著高于单独移植LK组;移植9周后各组外周血中外源血系细胞嵌合率为70%-80%,BM中为90%左右。研究结果表明FL和BM基质细胞中包含短梭形和成纤维细胞样两类细胞,且两类细胞具有不同的表面抗原表达模式;骨髓腔内移植LK细胞能达到较好的造血重建效果,FL基质细胞可能在造血重建的早期促进了受体血小板和红细胞的恢复,从而避免受体死于造血衰竭。
其他文献
水体中的重金属和有机污染物严重危害生态环境和人体健康。吸附技术用于处理该类污染物操作简单、费用低、效率高,但缺点是会达到吸附饱和。因此,吸附技术的关键是吸附剂既要能实现对污染物的有效去除,又要在使用完毕后易于从水中分离、脱附再生和反复使用。磁铁矿纳米颗粒易于从水中分离和反复使用,但本身吸附性能有限;氧化石墨烯对重金属阳离子吸附能力强,但难以从水中分离。本文的目的是以磁铁矿纳米颗粒和氧化石墨烯这两种
近年来,我国城镇污泥总量增长快速,其中大多数污泥未得到妥善的处置。污泥好氧堆肥技术运行成本低且适用于小规模处理,堆肥产品被市政绿化再利用,对我国污泥处理处置有很高的实用价值。本研究旨在分离纯化出适用于污泥好氧堆肥的高温菌株,以提高污泥堆肥效果,加速堆肥进程,同时探讨了污泥腐熟产品作为园林绿化肥料的可行性与潜力。主要研究成果如下:（1）从特定的菌源样品中分离并纯化出了在70℃下生长情况良好的高温菌株
为研究紫花苜蓿LEA基因抗逆功能,培育紫花苜蓿抗逆品系。本研究从紫花苜蓿“WL525”中克隆到的胚胎晚期富集蛋白基因Ms LEA2,属于LEA＿2家族。全长513bp,编码170个氨基酸,其蛋白分子量为18.67k D,等电点为4.42。本研究测定Ms LEA2基因在不同非生物胁迫（PEG、Na Cl和Al）与激素处理下（Me JA、SA和ABA）基因的表达量。实验结果显示Ms LEA2基因可受这
本论文在水解角蛋白拟无枝酸菌Amycolatopsis keratiniphila HCCB10007中建立了CRISPR/Cas9技术,探索了该基因编辑系统的可编辑长度,并采用CRISPR/Cas9技术和基因过表达研究了VB12生物合成途径中不同来源的关键酶基因cobA的表达对相关次级产物代谢途径的影响,为该菌株的基因操作提供了新的高效方法。1.建立了A.keratiniphila HCCB10
蛋白药物频繁注射且用药周期长的给药特点极大的降低了患者的顺行性。随着此类药物的广泛应用,改善其给药方式的治疗意义也愈加迫切。高效非注射制剂和长效缓释制剂是目前可以看到成药性的代替频繁注射的新剂型,其中,长效缓释制剂在多肽药物上已经有多个上市产品,而蛋白药,特别是大分子量（如分子量超过5万）的蛋白药的长效缓释制剂尚未成功。蛋白药在制剂过程中保持自然构象的条件之一是避免与有机溶剂的接触。为此,密歇根大
本文的工作主要聚焦大亚湾核电站建设过程中（1979—1994年）的危机及其应对。通过对这项工程所遇到的危机事件展开研究,试图回答以下问题:在三里岛核事故后的全球核能发展低谷,中央政府是如何避免战略误判,使中国的民用核能工业从零开始顺利起步?切尔诺贝利事故发生后,中央政府和香港当局又是如何化解近百万人参与的“香港反核”危机,使大亚湾核电站项目顺利开工?在核电站具体建设过程中,广东核电合营公司、深圳地
植入物作为一种药物剂型,具有局部靶向给药、长期控释药物、提高局部药物浓度、减少毒副作用、在局部起到机械支撑作用等优势。3D打印出现于上世纪80年代,是一种以数字模型为基础,通过增材制造进行实物制备的技术。目前,3D打印技术在众多领域应用广泛,在医药领域已经用于片剂、植入剂、微球等的制备以及生物打印。本研究利用3D打印技术进行了两种不同形状和结构的PLA/PCL植入物的制备,并对其进行了表征。我们利
载脂蛋白Eε4（apolipoprotein Eε4,APOE4）等位基因是目前唯一确定的散发性阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的高风险因素。最近的研究证实HSV-1在AD患者大脑中普遍存在,其中APOE4等位基因携带者比例更高,提示HSV-1与APOE4基因可加速AD发展进程。但是两者之间的具体关系和相互作用机制仍然不明确。本课题的第一部分在细胞水平研究载脂蛋白E（a
肿瘤免疫逃逸是肿瘤发生发展的重要因素之一,因此肿瘤免疫疗法是一种治疗恶性肿瘤的有效手段。CD47是免疫球蛋白超家族的成员之一,具有抑制巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的功能,在促进肿瘤生长、发展和转移中起关键性作用。阻断CD47和其配体SIRPα可以恢复和促进巨噬细胞吞噬功能,达到治疗恶性肿瘤的目的。因此,制备抗人CD47单克隆抗体,阻断CD47抑制肿瘤吞噬的功能,是肿瘤免疫疗法的新方向。本课题运用原核蛋白表
特发性肺纤维化是一种不可逆的肺部慢性疾病,目前尚缺少有效的临床治疗手段。石蒜碱是从石蒜科植物中分离得到的生物碱,具有显著的抗炎、抗病毒以及抗肿瘤等生物活性。但是,石蒜碱是否参与调控肺纤维化尚不清楚。本课题利用博来霉素诱导的肺纤维化小鼠动物模型及体外细胞实验,从整体-细胞-分子水平探究石蒜碱对肺纤维化的调控作用。我们的研究结果表明,腹腔注射石蒜碱可以有效缓解博来霉素诱导的小鼠的肺纤维化损伤,抑制肺纤