第一部分热应激对肿瘤细胞代谢重编程的作用及机制研究　　目的：研究不同热应激条件下肿瘤细胞的代谢重编程情况以及对肿瘤热消融治疗的指导意义。方法：设置37℃，44℃和47℃对人肿瘤细胞分别进行水浴加热10min，观察肿瘤细胞的存活和增殖状况。Western blot方法检测存活的细胞代谢变化。使用脂质氧化抑制剂Etomoxir和Ranolazine以及代谢关键酶CPT1A的siRNA转染抑制肿瘤细胞脂质氧化的水平，进行体外细胞的热应激实验，判断脂质氧化代谢转变是否与细胞热敏性和热耐受能力的改变有关。体内实验中进行小鼠荷瘤并行射频治疗，观察抑制脂质氧化对射频治疗效果的影响。通过检测PARP及线粒体膜电位变化探索脂质氧化水平降低影响细胞热敏性的内在机制。结果：热应激抑制了细胞的存活和增殖。轻度热应激时P-ACC表达增高，间接代表了脂质氧化水平升高。抑制脂质氧化后细胞热敏性提高。在小鼠皮下荷瘤加射频治疗模型中使用Etomoxir抑制脂质氧化可提高射频的治疗效果。Western blot及 JC-1检测显示热应激抑制脂质氧化可促进细胞凋亡和线粒体膜电位差下降。结论：热应激时肿瘤细胞提高脂质氧化水平以降低热敏性,抑制脂质氧化可促进细胞凋亡，提高热应激对肿瘤的杀伤效果。　　第二部分热应激对肿瘤微环境的作用及机制研究　　目的：通过模拟不同热应激温度，探讨不同热应激条件下肿瘤细胞与巨噬细胞之间的相互作用。方法：设置37℃，55℃和70℃共三个温度点。首先将小鼠肝癌细胞分别水浴加热，收取肿瘤细胞上清以培养巨噬细胞。分别RT-PCR方法检测iNOS及Arg-1表达，MSD方法检测IL-10和IL-12分泌量并观察不同条件下巨噬细胞的形态变化及极性转变特征。然后，收取不同条件刺激的巨噬细胞上清以培养肿瘤细胞，观察肿瘤细胞的增殖情况。结果：肿瘤细胞经37℃处理20min后，早期接触即可导致巨噬细胞激活并向M1型极性转变，iNOS表达上调，IL-12分泌增多；肿瘤细胞70℃处理20min后则易致巨噬细胞向M2型极性转变，Arg-1表达上调，IL-10分泌增多。M2样巨噬细胞可通过旁分泌方式反馈性促进肿瘤增殖。结论：不同热应激条件下巨噬细胞形态明显不同并呈现不同极性特征。肿瘤细胞热应激导致的巨噬细胞向M2型极性转变可潜在促进肿瘤的发展。